Monoklonaler Anti-PKR/EIF2AK2-Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – P19525

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PKR/EIF2AK2

• PKR/EIF2AK2 ist eine interferoninduzierte doppelsträngige RNA-abhängige Serin/Threonin-Proteinkinase, die auch Tyrosin-Proteinkinase-Aktivität aufweist und eine zentrale Rolle in der angeborenen Immunantwort gegen virale Infektionen spielt (PubMed:18835251, PubMed:19189853, PubMed:19507191). Zugehörige Referenzen: PMID:18835251 PMID:19189853 PMID:19507191
• Es phosphoryliert die α-Untereinheit des eukaryotischen Translationsinitiationsfaktors 2 (EIF2S1/eIF-2α) nach Aktivierung durch virale doppelsträngige RNA, was zu einer globalen Hemmung der Proteinsynthese und einer bevorzugten Translation von Stressantwort-mRNAs wie ATF4 führt und dadurch die virale Replikation unterdrückt (PubMed:19189853, PubMed:21123651, PubMed:22948139). Zugehörige Referenzen: PMID:19189853 PMID:21123651 PMID:22948139
• Es zeigt antivirale Aktivität gegen ein breites Spektrum von DNA- und RNA-Viren, darunter Hepatitis-C-Virus (HCV), Hepatitis-B-Virus (HBV), Masernvirus (MV) und Herpes-simplex-Virus 1 (HHV-1) (PubMed:11836380, PubMed:19189853, PubMed:19840259). Zugehörige Referenzen: PMID:11836380 PMID:19189853 PMID:19840259
• Über die Translationskontrolle hinaus moduliert PKR diverse Signalwege (p38-MAP-Kinase, NF-κB, Insulinsignalweg) und Transkriptionsfaktoren (JUN, STAT1, IRF1), um die Expression proentzündlicher Zytokine und Interferon-Gene zu regulieren (PubMed:22948139, PubMed:23084476, PubMed:23372823). Zugehörige Referenzen: PMID:22948139 PMID:23084476 PMID:23372823
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst Zytoplasma, Zellkern und perinukleäre Region; mit gewebspezifischer hoher Expression in Thymus, Milz und Knochenmark; erhöhte Werte werden bei Brust- und Dickdarmkarzinomen beobachtet, was mit Tumorprogression korreliert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung (Isopeptidbindung), die zur Regulation unter Stress- und Immunstimuli beitragen.
• Es enthält RNA-bindende Domänen und Kinase-Motive, wodurch es als ATP-bindende Transferase mit dualer Serin/Threonin- und Tyrosinkinase-Aktivität klassifiziert wird, die für die antivirale Abwehr und die Dynamik von Stressgranulen essenziell ist.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem synthetischen Peptid von Aminosäure 450-551, einer Region innerhalb der Kinasedomäne; berücksichtigen Sie dies bei der Beurteilung der Epitopspezifität und potenziellen Isoformerkennung.
• Dieser Antikörper ist validiert für Western Blotting (WB), Immunfluoreszenz/Immunozytochemie (IF/ICC) und ELISA; optimale Arbeitsverdünnungen sollten empirisch für jede Anwendung und jeden Probentyp bestimmt werden.
• Da PKR ein interferoninduzierbares Protein ist, kann eine Vorbehandlung von Zellen mit Typ-I-Interferon oder viralen Infektionsmimetika die Detektion in bestimmten experimentellen Modellen verbessern.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht von PKR beträgt 62 kDa, aber posttranslationale Modifikationen (z. B. Phosphorylierung) können leichte Verschiebungen verursachen; verwenden Sie geeignete Positivkontrollen (z. B. Interferon-behandelte HeLa- oder A549-Lysate).
• Kreuzreaktivität ist für humane Proben bestätigt; für andere Spezies wird eine Sequenzausrichtung vor der Verwendung empfohlen, da Kreuzreaktivität nicht garantiert werden kann.

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