Anti-PKM2-spezifisches polyklonales Kaninchen-Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P14618

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PKM2-Funktion und -Lokalisierung

• PKM2 katalysiert den letzten geschwindigkeitsbegrenzenden Schritt der Glykolyse, die Umwandlung von Phosphoenolpyruvat zu Pyruvat unter ATP-Produktion, und das Verhältnis von Tetramer zu Dimer steuert den Schalter zwischen Energieerzeugung und Bereitstellung biosynthetischer Vorstufen, der für das Überleben von Tumorzellen entscheidend ist.
  Verwandte Referenzen: PMID:15996096, PMID:1854723, PMID:20847263
• PKM2 ist die embryonale Isoform mit niedriger konstitutiver Pyruvatkinase-Aktivität, die eine allosterische Aktivierung durch D-Fructose-1,6-bisphosphat (FBP) erfordert; sie wird in den meisten adulten Geweben durch die Isoform PKM1 mit hoher Aktivität ersetzt.
  Verwandte Referenzen: PMID:18337823, PMID:20847263
• Im Zellkern fungiert PKM2 als Proteinkinase, die STAT3 bei Tyr-705 und Histon H3 bei Thr-11 phosphoryliert, um die Transkription von Genen wie VEGFA und CD274 anzutreiben und so den Stoffwechsel mit der Genexpression zu verknüpfen.
  Verwandte Referenzen: PMID:18191611, PMID:21620138, PMID:22056988, PMID:22306293, PMID:22901803, PMID:24120661, PMID:33314660
• PKM2 fördert die Tumorentstehung durch transkriptionelle Koaktivierung mit NF-κB und FOXM1 und beteiligt sich auch an Kaspase-unabhängigen Zelltodwegen.
  Verwandte Referenzen: PMID:17308100, PMID:26787900, PMID:33314660
• PKM2 unterliegt vielfältigen posttranslationalen Modifikationen – Acetylierung, Phosphorylierung, Methylierung, Hydroxylierung, S-Nitrosylierung und Ubiquitinierung –, die seine metabolischen und nicht-metabolischen Aktivitäten steuern.
• Es wirkt auch als cytosolisches Schilddrüsenhormon-bindendes Protein (CTHBP) und als Opa-interagierendes Protein (OIP-3), was multifunktionelle Rollen über die Glykolyse hinaus widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen liegt innerhalb der Aminosäuren 380–480 des menschlichen PKM2, einem Bereich, der es vom Splice-Varianten PKM1 unterscheiden kann; fügen Sie bei der Beurteilung der Isoformspezifität PKM1-Kontrollen hinzu.
• Für den Western Blot ist ein Band bei ~58 kDa zu erwarten; verwenden Sie Lysate aus menschlichen, murinen oder rattigen Krebszelllinien (z. B. HeLa, MCF-7) und fügen Sie positive und negative Kontrollen hinzu.
• Bei der Immunfluoreszenz oder ICC ist sowohl eine zytoplasmatische als auch eine nukleäre Färbung zu erwarten; optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle, um Epitope in beiden Kompartimenten zu erhalten.
• Für ELISA-Anwendungen kann das synthetische Peptid-Immunogen als positive Kontrolle dienen; erwägen Sie die Kombination mit einem Nachweisantikörper, der ein anderes Epitop für Sandwich-Assays erkennt.

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