Anti-PKM2 Kaninchen polyklonales Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P14618

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von PKM2

• PKM2 katalysiert den letzten geschwindigkeitsbestimmenden Schritt der Glykolyse, wandelt Phosphoenolpyruvat in Pyruvat um und erzeugt ATP. Seine Aktivität wird allosterisch reguliert, und das Gleichgewicht zwischen aktivem Tetramer und weniger aktivem Dimer steuert den metabolischen Fluss. Zugehörige Referenzen: PMID:15996096, PMID:1854723, PMID:20847263
• Das glykolytische Enzym wirkt zudem als Proteinkinase im Kern, phosphoryliert STAT3 an Tyr-705 und Histon H3 an Thr-11, um die Transkription zu regulieren. Zugehörige Referenzen: PMID:18191611, PMID:21620138, PMID:22056988, PMID:22306293, PMID:22901803, PMID:24120661
• Kernständiges PKM2 fördert zusammen mit NF-kB-Untereinheiten die Transkription von VEGFA, verstärkt die Angiogenese und steuert die Expression von CD274 in spezifischen Immunkontexten. Zugehörige Referenzen: PMID:33314660
• PKM2 spielt eine entscheidende Rolle bei Proliferation und Überleben von Tumorzellen; seine Expression ist in vielen Krebsarten hochreguliert, wodurch es zu einem zentralen metabolischen und regulatorischen Knotenpunkt bei der Tumorentstehung wird. Zugehörige Referenzen: PMID:18337823, PMID:22901803, PMID:26787900
• Das Protein ist überwiegend zytoplasmatisch, wandert aber nach Signalgebung (z. B. EGFR-Aktivierung) in den Kern, um seine nicht-metabolischen Funktionen auszuüben.
• PKM2 wird spezifisch in proliferierenden Zellen exprimiert, einschließlich embryonaler Stammzellen und Krebszellen, und kann in differenzierten Geweben durch die adulte PKM1-Isoform ersetzt werden. Zugehörige Referenzen: PMID:18337823, PMID:20847263
• Posttranslationale Modifikationen wie Acetylierung, Phosphorylierung und Hydroxylierung regulieren seine Aktivität und subzelluläre Lokalisierung fein.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 11-221 von PKM2 (NP_001193728.1) ab, eine Region, die die N-terminale Domäne umfasst. Testen Sie eine Reihe von Antikörperverdünnungen (z. B. 1:500–1:5000 für WB) und optimieren Sie die Blockierungsbedingungen für das beste Signal-Rausch-Verhältnis.
• Für IF/ICC fixieren und permeabilisieren Sie Zellen angemessen und validieren Sie das Färbemuster anhand der bekannten subzellulären Verteilung von PKM2 im entsprechenden Zelltyp.
• Bei der Durchführung von ELISA schließen Sie geeignete Positive- und Negative-Kontrollen ein, um die Reaktivität und Spezifität des Antikörpers zu bestätigen.
• Aufgrund der Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-PKM2 ist der Antikörper möglicherweise zum Nachweis des Ziels in Nagetiermodellen geeignet; bestätigen Sie dies jedoch durch Sequenzalignments und Pilotexperimente.

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