Anti-PKC zeta Monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q05513

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PKC zeta Funktion und Lokalisierung

• Proteinkinase C zeta (PKC zeta, PRKCZ) ist eine atypische Proteinkinase-C (aPKC)-Isoform, die kalzium- und diacylglycerol-unabhängig ist und zur Familie der Serin/Threonin-Kinasen gehört. Sie wird vom PRKCZ-Gen kodiert und spielt eine kritische Rolle in Signaltransduktionswegen, die das Zellwachstum, das Überleben und Entzündungen regulieren.
• PKC zeta fungiert stromabwärts der Phosphatidylinositol-3-Kinase (PI3K) und nimmt an der Kaskade der mitogenaktivierten Proteine (MAP-Kinasen) teil. Es vermittelt die Insulinsignalübertragung und trägt zum Glucosetransport durch SLC2A4/GLUT4-Translokation in Adipozyten bei und aktiviert die MAP2K1/MEK1-MAPK1/ERK2-Signalgebung unabhängig von RAF1 nach mitogenen Stimuli.
• Eine Schlüsselrolle von PKC zeta liegt in der Aktivierung des Transkriptionsfaktors NF-kappa-B. Durch Interaktion mit SQSTM1/p62 und Adaptern wie RIPK1 und TRAF6 phosphoryliert und aktiviert es die IKBKB-Kinase, was zum Abbau von NF-kappa-B-Inhibitoren führt und die Expression von Entzündungsgenen fördert. Es phosphoryliert auch die RELA-Untereinheit bei Ser-311 und behebt damit die SETD6-vermittelte Repression.
• PKC zeta ist an der Etablierung der Zellpolarität beteiligt. In wandernden Astrozyten bildet es einen Komplex mit PARD6A und wird von CDC42 rekrutiert, um die Funktion von Mikrotubulusmotoren und Dynein zu koordinieren. Diese Polaritätsfunktion ist entscheidend für die gerichtete Zellmigration und die asymmetrische Zellteilung.
• In neuronalen Kontexten assoziiert PKC zeta mit FEZ1, um die neuronale Differenzierung in PC12-Zellen zu stimulieren, und ist für die späte Phase der Langzeitpotenzierung (LTP) in Hippocampus-CA1-Zellen sowie die Erhaltung des Langzeitgedächtnisses erforderlich.
• PKC zeta phosphoryliert verschiedene Substrate: Es phosphoryliert VAMP2 in vitro und phosphoryliert und aktiviert auch LRRK1, das anschließend RAB-Proteine phosphoryliert, die am intrazellulären Transport beteiligt sind. Verwandte Referenzen: PMID:17313651 PMID:36040231
• Subzellulär kommt PKC zeta im Zytoplasma, in Endosomen, an Zellverbindungen und in der Membran vor, was konsistent mit seinen Rollen in der Signalgebung und im Transport ist. Es ist weit verbreitet exprimiert, mit der höchsten Expression im Gehirn und niedrigeren Werten in Lunge, Niere und Hoden.
• Das Protein unterliegt der Verwendung alternativer Promotoren und alternativem Spleißen, was zu Isoformen führt. Es enthält eine ATP-Bindungsdomäne, einen Zinkfinger (Phorbolester/DAG-Typ) und mehrere Phosphorylierungsstellen. Sein Molekulargewicht beträgt ca. 67,7 kDa, aber beobachtete Banden bei 46 kDa, 56 kDa und 67 kDa entsprechen wahrscheinlich Isoformen oder posttranslationalen Modifikationen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das den N-terminalen 100 Aminosäuren von menschlichem PKC zeta (NP_002735.3) entspricht. Führen Sie einen Western Blot (WB) durch, berücksichtigen Sie, dass mehrere Isoformen oder posttranslationale Modifikationen zu Banden bei 46 kDa, 56 kDa oder 67 kDa führen können; validieren Sie das beobachtete Molekulargewicht in Ihrem Probentyp.
• Für ELISA-Anwendungen stellen Sie sicher, dass der Antikörper die native Konformation oder lineare Epitope nach Bedarf erkennt; führen Sie Titrationsversuche durch, um die Antikörperkonzentration zu optimieren.
• Da der Antikörper reaktiv mit menschlichem PKC zeta ist, eignet er sich für humane Proben. Über Kreuzreaktivitäten mit anderen Spezies wurde nicht berichtet, daher wird eine Validierung empfohlen, wenn nicht-menschliche Systeme verwendet werden.
• Der Antikörper wird in flüssiger Form mit Versand im Eisbeutel geliefert; aliquotieren und lagern Sie ihn nach Erhalt bei geeigneten Temperaturen, um die Stabilität zu gewährleisten.

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