Anti-PKC alpha Rabbit PolymAb® für WB und ELISA - P17252

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PKC alpha

• Protein Kinase C alpha Typ (PKCα) ist eine calciumaktivierte, phospholipid- und diacylglycerol-(DAG)-abhängige Serin/Threonin-Proteinkinase, die vom PRKCA-Gen kodiert wird. Sie gehört zur Familie der Proteinkinasen C und enthält regulatorische Zinkfingerdomänen sowie eine katalytische Kinasedomäne.
• In der Krebsbiologie ist PKCα stark in Gliomen und Brustkrebsen exprimiert, wo es als Tumorpromoter wirkt und zu malignen Phänotypen beiträgt, indem es Zellproliferation, Apoptose und Migration über Signalwege wie MAPK/ERK reguliert.
• PKCα spielt eine wichtige kardiovaskuläre Rolle: Es moduliert die myokardiale Kontraktilität negativ, indem es kardiales Troponin T (TNNT2) phosphoryliert, fördert die kardiale Hypertrophie über ERK1/2-Signalgebung und ist für die Kardiomyozytenhypertrophie nach PMA-Stimulation erforderlich.
• Bei Angiogenese und Blutplättchenfunktion vermittelt PKCα die VEGFA-induzierte Proliferation und Röhrenbildung von Endothelzellen und aktiviert Blutplättchen-Integrin αIIbβ3 über den RAP1GAP-Signalweg, was die calciuminduzierte Blutplättchenaggregation und Thrombusbildung fördert.
• PKCα phosphoryliert wichtige nachgeschaltete Substrate: Es phosphoryliert den CDC42-Guanin-Austauschfaktor DOCK8, um die CDC42-Aktivität während der T-Zellmigration zu verstärken, phosphoryliert KLHL3, um dessen Interaktion mit WNK4 als Antwort auf Angiotensin II zu verringern, und aktiviert LRRK1, das an der RAB-vermittelten intrazellulären Transport beteiligt ist. Verwandte Referenzen: PMID:28028151 PMID:25313067 PMID:36040231
• Subzellulär lokalisiert sich PKCα dynamisch im Zytoplasma, an der Zellmembran, der Mitochondrienmembran und im Zellkern und transloziert zwischen Kompartimenten als Antwort auf Stimuli. Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Acetylierung.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Für Western Blot empfehlen sich Positivkontrollen wie HeLa-, MCF-7- oder A431-Zellysate, die endogenes PKCα exprimieren. Ein Anfangsverdünnungsbereich sollte empirisch bestimmt werden.
• Da das Immunogen rekombinantes humanes PKCα-Protein ist und Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte beschrieben wurde, validieren Sie den Antikörper im relevanten Probensystem, um die spezies-spezifische Detektion zu bestätigen.
• Für ELISA-Anwendungen prüfen Sie die Paarung mit einem geeigneten Fangantikörper und optimieren Sie die Assaybedingungen; rekombinantes PKCα-Protein kann als Standard dienen.
• Phosphorylierungsabhängige Konformationsänderungen können die Antikörperbindung beeinflussen; wenn Sie aktiviertes PKCα untersuchen, erwägen Sie eine Vorbehandlung mit Phorbolestern (z. B. PMA) oder anderen Stimuli in zellulären Assays.

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