Anti-PKC-alpha-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – P17252

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PKC alpha

• Die Proteinkinase C alpha (PKCα) ist eine calciumaktivierte, phospholipid- und diacylglycerolabhängige Serin/Threonin-Proteinkinase, die vom PRKCA-Gen kodiert wird. Sie gehört zur PKC-Familie und enthält charakteristische Zinkfinger-Domänen sowie eine ATP-Bindungsstelle.
• PKCα spielt eine zentrale Rolle bei Zellproliferation, Differenzierung, Apoptose, Migration und Adhäsion. Sie fördert das Zellwachstum über die RAF1-vermittelte MAPK/ERK-Signalkaskade und kann durch Hochregulierung der CDK-Inhibitoren CDKN1A und CDKN1B auch einen Zellzyklusarrest induzieren.
• Sie weist eine antiapoptotische Aktivität in Krebszellen auf; beispielsweise phosphoryliert sie BCL2, um die Apoptose zu blockieren, und unterdrückt in Gliomzellen die p53/TP53-vermittelte Aktivierung von IGFBP3.
• PKCα wird in vielen Krebsarten stark exprimiert und fungiert als Tumorförderer, wodurch sie zu malignen Phänotypen in Gliomen und Mammakarzinomen beiträgt.
• Im kardiovaskulären System reguliert sie die myokardiale Kontraktilität negativ durch Phosphorylierung von kardialem Troponin T (TNNT2/CTNT) und vermittelt die Hypertrophie von Kardiomyozyten über die MAPK1/3-(ERK1/2)-Signalkaskade.
• Sie ist an Angiogenese, Thrombozytenaggregation und Entzündungsprozessen beteiligt. Sie reguliert die Migration von Endothelzellen und die VEGFA-Signalübertragung und moduliert LPS-induzierte Makrophagenreaktionen.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst Zytoplasma, Zellmembran, Mitochondrienmembran und Zellkern. Eine stimulusabhängige Translokation findet statt, beispielsweise eine Verlagerung zu den Lamellipodien nach einer Verletzung oder in den Zellkern während der Makrophagendifferenzierung.
• Zu den weiteren Phosphorylierungszielen gehören DOCK8 (reguliert die T-Zell-Migration durch Aktivierung von CDC42), KLHL3 (moduliert die WNK4-Interaktion als Reaktion auf Angiotensin II) und LRRK1 (steuert den Transport von RAB-Proteinen). Zugehörige Referenzen: PMID:28028151 PMID:25313067 PMID:36040231

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht einer C-terminalen Region (AS 573–672) des humanen PKC alpha. Diese Sequenz ist bei Mensch, Maus und Ratte hochkonserviert, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für Western Blot können Sie mit Verdünnungen zwischen 1:500 und 1:2000 beginnen und die Reaktivität an Lysaten aus Zelllinien oder Geweben validieren, von denen bekannt ist, dass sie PKCα exprimieren, beispielsweise Gehirn, Herz oder Krebszelllinien.
• Bei IHC-P kann eine Antigenrückgewinnung erforderlich sein. Optimieren Sie die Fixierungs- und Rückgewinnungsbedingungen für Ihren Probentyp. Schließen Sie geeignete Positiv- und Negativkontrollen ein.
• Als polyklonaler Antikörper kann die Leistung zwischen verschiedenen Chargen variieren. Es ist ratsam, jede neue Charge zu titrieren und die Spezifität im relevanten Modellsystem zu bestätigen.

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