Anti-PKA RIIα (PRKAR2A) monoklonaler Kaninchen-Antikörper für WB, ELISA – P13861

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von PRKAR2A

• PRKAR2A kodiert die regulatorische Alpha-Untereinheit der cAMP-abhängigen Proteinkinase Typ II, auch bekannt als PKR2, die eine zentrale Komponente des PKA-Holoenzymkomplexes ist.
• Das Protein enthält zwei cAMP-Bindungsdomänen und fungiert als regulatorische Untereinheit, die in Abwesenheit von cAMP die katalytische Aktivität der PKA hemmt; bei der Bindung von cAMP dissoziiert es und aktiviert die Kinase.
• Regulatorische Untereinheiten des Typs II vermitteln die Membranassoziation durch Bindung an A-Kinase-verankernde Proteine (AKAPs), wodurch die PKA-Aktivität in bestimmten subzellulären Kompartimenten lokalisiert und die cAMP-Signalübertragung mit anderen Signalwegen integriert wird.
• PRKAR2A ist eines von vier Isoformen der regulatorischen Untereinheiten (I-alpha, I-beta, II-alpha und II-beta), deren Expression in verschiedenen Geweben variiert und je nach Zelltyp konstitutiv oder induzierbar ist.
• Auf subzellulärer Ebene kommt PRKAR2A im Zytoplasma vor und ist mit der Zellmembran assoziiert, was seine Rolle bei der kompartimentalisierten cAMP-Signalübertragung widerspiegelt.
• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung und Acetylierung, die seine Aktivität und Wechselwirkungen modulieren können (UniProt-Schlüsselwörter: Acetylierung, Phosphoprotein).

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der C-terminalen Region (Aminosäuren 312–404) des humanen PRKAR2A und umfasst einen Teil der zweiten cAMP-Bindungsdomäne; dies sollte bei der Bewertung der Kreuzreaktivität zwischen Isoformen berücksichtigt werden.
• Beim Western Blotting sollte in Lysaten humaner Zellen eine Bande bei etwa 46 kDa nachgewiesen werden; validieren Sie den Antikörper im entsprechenden Probensystem, um seine Spezifität zu bestätigen.
• Dieser Antikörper ist für ELISA geeignet; die optimalen Arbeitsverdünnungen sollten vom Endanwender experimentell bestimmt werden.
• Da der Antikörper gegen ein rekombinantes Fragment erzeugt wurde, erkennt er möglicherweise lineare Epitope; für den Nachweis des nativen Proteins sollte erwogen werden, die Testung unter Bedingungen durchzuführen, die die Konformationsstrukturen erhalten.

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