Anti-Pin1 polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q13526

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Pin1

• Pin1 (Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase NIMA-interacting 1) ist eine Peptidyl-prolyl cis/trans-Isomerase (PPIase), die spezifisch phosphorylierte Ser/Thr-Pro-Motive bindet und isomerisiert. Sie wirkt als molekularer Schalter in mehreren zellulären Prozessen. Verwandte Referenzen: PMID:21497122 PMID:23623683 PMID:29686383
• Reguliert die Mitose durch Interaktion mit NIMA und schwächt dessen mitosefördernde Aktivität ab; transaktiviert zudem Onkogene und induziert Zentrosomenamplifikation, Chromosomeninstabilität und Zelltransformation. Verwandte Referenzen: PMID:21497122 PMID:22033920
• Mittelt die phosphorylierungsabhängige Proteindegradation von Zielmolekülen wie PML, BCL6, FBXW7 und RBBP8/CtIP und beeinflusst die Wahl des DNA-Reparaturwegs sowie onkogene Signalgebung. Verwandte Referenzen: PMID:17828269 PMID:22608923 PMID:23623683 PMID:27561354
• Downreguliert die Kinaseaktivität von BTK und ist erforderlich für die effiziente Dephosphorylierung und das Recycling von RAF1 nach Mitogenaktivierung. Verwandte Referenzen: PMID:16644721 PMID:15664191
• Katalysiert die Isomerisierung von phosphoryliertem PGK1, um die mitochondriale Zielsteuerung unter Hypoxie zu fördern, sowie von IRAK3, um die proinflammatorische Genexpression in dendritischen Zellen nach IL33-Stimulation zu induzieren. Verwandte Referenzen: PMID:26942675 PMID:29686383
• Lokalisiert im Kern, in nuklearen Speckles und im Zytoplasma, was seine vielfältigen funktionellen Rollen widerspiegelt.
• Gewebeexpression: nachweisbar in Immunzellen der Lunge; die phosphorylierte Form an Ser-71 ist in normalen Brustgewebezellen vorhanden, aber in Brustkrebszellen abwesend. Verwandte Referenzen: PMID:29686383

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen deckt das volllängige humane Pin1-Protein (Aminosäuren 1–163) ab und umfasst sowohl die WW-Domäne als auch die katalytische PPIase-Domäne. Dieses Design führt in der Regel zu Antikörpern, die konservierte Epitope erkennen, was die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte unterstützt.
• Für das Western Blotting sollten Sie die Verdünnung des primären Antikörpers entsprechend der endogenen Pin1-Expressionshöhe in Ihrem Proben System optimieren. Als Positivkontrolle können Lysate von HeLa, Jurkat oder A549 verwendet werden.
• Bei IF/ICC sollten Sie Zellen angemessen fixieren und permeabilisieren; rechnen Sie mit einem Kern- und Zytoplasma-Färbemuster, das der doppelten Lokalisation von Pin1 entspricht. Validieren Sie die Spezifität mit Knockdown- oder Knockout-Kontrollen.
• Für ELISA kann der Antikörper zur Capture oder Detektion verwendet werden; eine Paarung mit einem passenden Antikörper oder die Verwendung von rekombinantem Pin1 als Standard wird empfohlen.
• Titrieren Sie den Antikörper immer unter Ihren spezifischen Versuchsbedingungen und verwenden Sie geeignete Kontrollen, um die Spezifität des Signals sicherzustellen.

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