Anti-PIKFYVE Kaninchen polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q9Y2I7

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von PIKFYVE

• PIKFYVE, auch bekannt als PIP5K3, ist eine Lipid- und Serinproteinkinase mit Doppelspezifität, die das einzige Enzym für die Synthese von Phosphatidylinositol-3,5-bisphosphat (PtdIns(3,5)P2) aus Phosphatidylinositol-3-phosphat ist (PubMed:17556371, PubMed:41639454). Verwandte Referenzen: PMID:17556371 | PMID:41639454
• Das Protein enthält eine N-terminale FYVE-Zinkfingerdomäne, die es an endosomale Membranen bindet. Es lokalisiert hauptsächlich auf frühen und späten Endosomen, Phagosomen und zytoplasmatischen Vesikeln.
• PIKFYVE ist ein kritischer Regulator der Endomembranhomöostase, der die Spaltung, Fusion und Reifung von Endosomen steuert; es ist essenziell für den Übergang von frühen zu späten Endosomen und für die lysosomale Funktion (PubMed:30612035, PubMed:22621786). Verwandte Referenzen: PMID:30612035 | PMID:22621786
• Über seine Lipidkinaseaktivität reguliert PIKFYVE Autophagie, Vakuolenreifung und Nährstoffrückgewinnung, indem es das Recycling von lysosomalen Inhalten zurück in das Endosomennetzwerk erleichtert (PubMed:27623384). Verwandte Referenzen: PMID:27623384
• Die Kinase spielt auch eine Rolle bei der Insulinsignalgebung und GLUT4-Translokation und trägt damit zur systemischen Glukosehomöostase bei (Ähnlichkeit).
• In Immunzellen ist PIKFYVE erforderlich für die Phagosom-Lysosom-Fusion, ROS-Generierung und Antigenpräsentation über MHC-Klasse II – Prozesse, die für die angeborene und adaptive Immunität lebenswichtig sind (PubMed:28779020, PubMed:30612035). Verwandte Referenzen: PMID:28779020 | PMID:30612035
• Die Autophosphorylierung von PIKFYVE herabreguliert dessen Lipidkinaseaktivität und stimuliert die Lipidphosphatase FIG4, wodurch eine regulatorische Schleife entsteht, die den PtdIns(3,5)P2-Spiegel feinabstimmt (PubMed:33098764). Verwandte Referenzen: PMID:33098764
• Bemerkenswert ist, dass das Enzym von Coronaviren wie SARS-CoV und SARS-CoV-2 missbraucht wird, um den Zelleintritt via Endozytose zu erleichtern.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da das Immunogen die Aminosäuren 269–545 von menschlichem PIKFYVE umfasst, erkennt der Antikörper das endogene Protein erwartungsgemäß in Proben von Mensch, Maus und Ratte. Für das Western Blotting beachten Sie das hohe Molekulargewicht (~237 kDa): Verwenden Sie ein Acrylamidgel mit niedrigem Prozentanteil (z. B. 6–8%) und verlängerte Transferzeiten, um einen effizienten Proteintransfer sicherzustellen.
• Für ELISA kann dieser Antikörper als Fang- oder Nachweisreagenz für rekombinantes PIKFYVE-Protein verwendet werden; ermitteln Sie die optimalen Beschichtungskonzentrationen empirisch.
• Fügen Sie geeignete Positiv- und Negativkontrollen hinzu, z. B. Lysate von Zellen mit bekannter PIKFYVE-Expression, und validieren Sie den Antikörper in dem relevanten experimentellen System.

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