Anti-PIK3CA-polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P42336

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PIK3CA

• PIK3CA codiert für die katalytische p110-alpha-Untereinheit der PI3K, einer Lipidkinase, die Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphat (PtdIns(4,5)P2) phosphoryliert und dadurch Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphat (PIP3), einen wichtigen sekundären Botenstoff, erzeugt.
  Verwandte Referenzen: PMID:15135396, PMID:23936502, PMID:28676499
• PIP3 rekrutiert Proteine mit Pleckstrin-Homologie-(PH-)Domäne wie AKT1 und PDPK1 an die Membran und initiiert Signalkaskaden, die Zellwachstum, Proliferation, Überleben, Motilität und die Reorganisation des Zytoskeletts fördern.
• PIK3CA weist eine intrinsische Serin-Proteinkinase-Aktivität auf, die die Autophosphorylierung der regulatorischen p85-alpha-Untereinheit sowie die Phosphorylierung von Substraten wie 4EBP1 und H-Ras ermöglicht und dadurch möglicherweise nachgeschaltete Signalwege moduliert.
  Verwandte Referenzen: PMID:23936502, PMID:28676499
• Es wird durch Rezeptor-Tyrosinkinasen (z. B. EGFR, Insulinrezeptor, VEGFR) und RAS aktiviert und spielt eine wesentliche Rolle bei der Wachstumsfaktorsignalübertragung, der Angiogenese und der Gefäßentwicklung.
• PIK3CA wird als Protoonkogen klassifiziert; somatische aktivierende Mutationen werden häufig in einer Vielzahl menschlicher Krebsarten nachgewiesen und treiben eine unkontrollierte Aktivierung des PI3K/AKT-Signalwegs voran.
• Das Protein ist außerdem an Phagozytose und Pinozytose beteiligt, obwohl die genauen Mechanismen noch nicht vollständig charakterisiert sind (aufgrund von Ähnlichkeiten).

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 401–600 des humanen PIK3CA; diese zentrale Region ist bei Mensch, Maus und Ratte hochkonserviert, was mit der berichteten Kreuzreaktivität übereinstimmt.
• Im Western Blot wandert PIK3CA bei einem vorhergesagten Molekulargewicht von etwa 124 kDa; stellen Sie eine ausreichende Auflösung bei der Gelelektrophorese und beim Transfer sicher.
• Validieren Sie die Antikörperleistung in relevanten Lysaten positiver Kontrollen (z. B. Krebszelllinien, die PIK3CA überexprimieren oder mit Wachstumsfaktoren stimuliert wurden), bevor Sie ihn in experimentellen Proben einsetzen.
• Optimieren Sie für die Immunhistochemie (IHC-P) die Protokolle zur Antigenfreilegung (z. B. hitzeinduzierte Epitopfreilegung) und erwägen Sie eine Titration der Antikörperkonzentration, um eine spezifische Färbung zu erzielen.
• Da PIK3CA an zahlreichen Signalnetzwerken beteiligt ist, sollten Sie geeignete Signalweg-Inhibitoren in funktionelle Studien einbeziehen, wenn Sie den Antikörper zur Kodetektion oder zum Pull-down verwenden.

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