Anti-PIF4 Kaninchen-Polyclonale Antikörper für WB und ELISA – Q8W2F3

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des Transkriptionsfaktors PIF4

• Transkriptionsfaktor PIF4, auch bekannt als AtPIF4, bHLH9, EN102 und SRL2, ist ein basisches Helix-Schleife-Helix-Protein, das vom PIF4-Gen in Arabidopsis thaliana kodiert wird. Er integriert Licht- und Temperatursignale zur Regulation des Wachstums.
• Wirkt negativ in der Phytochrom-B-Signalgebung und kontrolliert die Expression von Genen, die an der Zellexpansion beteiligt sind, durch Bindung an G-Box-Motive (gemäß Ähnlichkeit).
• Wird unter geringem Blaulicht durch die Kryptochrome CRY1 und CRY2 aktiviert, bindet direkt an E-Box-Varianten (5'-CA[CT]GTG-3') im Chromatin, um die Genexpression für adaptive Antworten wie die Hypokotylverlängerung zu stimulieren. Verwandte Referenzen: PMID:26724867
• Kooperiert mit dem transkriptionellen Koaktivator PTAC12/HMR/PAP5 und der Mediator-Untereinheit MED14 zur Regulation thermoresponsiver Wachstumsgene, hauptsächlich solchen, die an der Auxinbiosynthese und -signalgebung beteiligt sind, und fördert die Thermomorphogenese wie die Hypokotylverlängerung bei warmen Temperaturen. Verwandte Referenzen: PMID:30635559 PMID:33824329 PMID:36063057
• Lokalisiert ausschließlich im Zellkern, was seiner Rolle als Transkriptionsfaktor entspricht.
• Wird überwiegend in Blättern, Stängeln und Keimlingen exprimiert, mit geringeren Gehalten in Früchten, Blüten und Wurzeln, was seine Bedeutung für das vegetative Wachstum unterstreicht.
• Unterliegt alternativem Spleißen, wodurch Proteinvarianten entstehen, die seine Aktivität in verschiedenen entwicklungsbiologischen und umweltbedingten Kontexten feinabstimmen können.
• Molekulargewicht: 48,4 kDa (berechnet aus der Sequenz); als Referenzproteom annotiert und beteiligt an Phytochrom-Signalgebung, Transkriptionsregulation und Stressantworten.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 300-400 von Arabidopsis PIF4 (NP_565991.2) umfasst. Aufgrund der polyclonalen Natur dieses Antikörpers kann er mehrere Epitope erkennen und potenziell Kreuzreaktivität mit eng verwandten bHLH-Proteinen aufweisen; eine Validierung im spezifischen experimentellen System wird empfohlen.
• Für Western Blot verwenden Sie Ganzzell- oder kernangereicherte Extrakte aus Geweben von Arabidopsis thaliana wie Keimlingen oder Blättern, in denen PIF4 stark exprimiert ist. Eine optimale Detektion kann die Optimierung von Blockierung und Antikörperverdünnung erfordern.
• Dieser Antikörper ist für ELISA geeignet, das zur quantitativen Bestimmung von PIF4-Proteinmengen in Pflanzenlysaten eingesetzt werden kann. Verwenden Sie zur genauen Quantifizierung eine Standardkurve mit rekombinantem PIF4-Protein.
• Da PIF4 in Licht- und Temperatursignalwegen fungiert, sollten die experimentellen Bedingungen (Lichtregime, Temperatur) sorgfältig kontrolliert werden, um eine unbeabsichtigte Modulation der PIF4-Expression zu vermeiden.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt 48 kDa; achten Sie auf potenzielle Abbaubanden und fügen Sie bei der Probenvorbereitung Proteaseinhibitoren hinzu.

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