Anti-PICK1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für IHC-P, ELISA - Q9NRD5

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: PICK1-Funktion und -Lokalisierung

• PICK1 (PRKCA-bindendes Protein), auch als Protein interacting with C kinase 1 oder PRKCABP bezeichnet, fungiert als Adapterprotein, das durch PDZ-Domain-Interaktionen an verschiedene Membranproteine bindet und deren subzelluläre Lokalisierung organisiert.
• Es spielt eine kritische Rolle bei der synaptischen Plastizität, indem es das Trafficking und die Internalisierung von AMPA-Typ-Glutamatrezeptoren reguliert, möglicherweise durch PRKCA-abhängige Mechanismen.
• PICK1 hemmt die aktin-nukleierende Aktivität des Arp2/3-Komplexes kompetitiv mit Nukleations-promotierenden Faktoren und moduliert so die neuronale Morphologie und die AMPAR-Endozytose.
• Es ist für das Schrumpfen von Dornfortsätzen (Spines) während der Langzeitdepression (LTD) an exzitatorischen Synapsen erforderlich und verknüpft die Aktindynamik mit der synaptischen Schwächung.
• PICK1 lokalisiert sich im Zytoplasma, im perinukleären Bereich, an der Membran, in der postsynaptischen Dichte, an der Synapse, im Synaptosom und assoziiert mit dem Zytoskelett.
• Ubiquitär exprimiert, reguliert PICK1 auch die Morphologie von Astrozyten durch Antagonisierung des Arp2/3-Aktivators WASL/N-WASP.
• Zu den zusätzlich berichteten Funktionen gehört die Regulation von säuresensitiven Ionenkanälen (ASIC1/ASIC3).
• Das Protein enthält Metallbindungsstellen (Zink, Kalzium) und Stellen für Lipidmodifikationen (Palmitoylierung) und ist einer Phosphorylierung unterworfen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 300–400 von menschlichem PICK1 (nahe dem C-Terminus). Epitop-Mapping deutet darauf hin, dass der Antikörper ein lineares Epitop innerhalb dieses Bereichs erkennen könnte; erwägen Sie die Verwendung des Peptids für kompetitive Hemmung im ELISA, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für IHC-P werden klassische Antigen-Retrieval-Methoden (wärmeinduziert oder enzymatisch) empfohlen, und die Färbemuster sollten die bekannten subzellulären Lokalisierungen wie zytoplasmatische und postsynaptische Dichten widerspiegeln. Validieren Sie in normalem menschlichen Gehirngewebe oder anderen PICK1-exprimierenden Geweben.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, können Chargenunterschiede auftreten; es ist ratsam, Pilotexperimente durchzuführen und positive sowie negative Kontrollen einzubeziehen.
• Obwohl ursprünglich nicht für Western Blot validiert, kann bei einem Versuch eines WB nach Hitzedenaturierung eine Detektion der Zielbande bei ~47 kDa beobachtet werden; die Optimierung von Blocking und Antikörperkonzentration ist unerlässlich.

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