Anti-PIAS1+PIAS1 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – O75925/O75928

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PIAS1/PIAS2

• PIAS1 wirkt als E3-SUMO-Ligase und SUMO-Verbindungsfaktor, der die SUMOylierung verschiedener Substrate katalysiert. Es fungiert als kritischer transkriptioneller Koregulator, der die STAT-, p53- und Steroidhormon-Signalwege moduliert und je nach zellulärem Kontext die Genexpression entweder aktiviert oder reprimiert. Verwandte Referenzen: PMID:11583632, PMID:11867732, PMID:14500712
• PIAS1 bindet in vitro an A/T-reiche DNA-Sequenzen und interagiert direkt mit genregulatorischen Regionen wie der TAAT-Box des MYOD1-Promoters, um die Bindung von Transkriptionsfaktoren unabhängig von seiner SUMOylierungsaktivität zu regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:15133049
• PIAS1 lokalisiert hauptsächlich zu Kernspeckeln und PML-Körpern, zusätzlich ist es im Zytoplasma vorhanden und assoziiert mit dem Zytoskelett, was seine Rollen sowohl bei Kernprozessen als auch bei zytoplasmatischen Signalwegen unterstützt.
• Die Gewebeexpression ist breit, mit besonders hohen Gehalten im Hoden, was auf spezialisierte Funktionen bei der Keimzellentwicklung hindeutet.
• PIAS1 sumoyliert wichtige Reparatur- und Chromatinfaktoren: Es stabilisiert MRE11 auf Chromatin während der DNA-Endresektion und vermittelt die paralog-selektive Sumoylierung von MTA1 zur Kontrolle der Genexpression. Verwandte Referenzen: PMID:36050397, PMID:21965678
• Während einer Virusinfektion schränkt PIAS1 die lytische Replikation des Epstein-Barr-Virus (EBV) durch Hemmung viraler Transkriptionsfaktoren ein; das Virus kann diese Einschränkung durch caspasevermittelte Spaltung von PIAS1 umgehen. Verwandte Referenzen: PMID:29262325
• Dieser Antikörper erkennt auch PIAS2 (PIASx), eine eng verwandte E3-SUMO-Ligase, die im C-terminalen Bereich umfangreiche Sequenzähnlichkeit mit PIAS1 teilt und an analogen transkriptionellen Regulationswegen beteiligt ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 552–651 von humanem PIAS1 umfasst; bei der Western Blot ist eine Hauptbande bei etwa 76 kDa sowohl für PIAS1 als auch für PIAS2 zu erwarten.
• Für WB und IHC-P sollten Sie Positivkontrolllysate aus Hoden oder Zelllinien mit hoher Expression von PIAS1/2 verwenden und den Antikörper mit rekombinanten Proteinen oder siRNA/shRNA-Knockdown validieren.
• Die optimale Antikörperverdünnung muss empirisch bestimmt werden; beginnen Sie unter Standardbedingungen mit 1:500–1:2000 für WB und 1:100–1:500 für IHC-P.
• Aufgrund der hohen Konservierung der Epitopregion erkennt dieser Antikörper auch PIAS2, es ist jedoch ratsam, die Spezifität in Knockout- oder Knockdown-Modellen zu bestätigen.
• Für ELISA-Anwendungen kann beim Beschichtungsantigen eine Optimierung der Peptid- oder Proteinfängerung erforderlich sein; verwenden Sie als Positivkontrolle das Immunogenpeptid.

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