Anti-PI3K p85α/p55γ/p85β Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P27986 / O00459 / Q92569

Kern-Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: PI3K p85α/p55γ/p85β (PIK3R1/PIK3R2/PIK3R3) Funktion und Lokalisierung

• Die PI3K-regulatorischen Untereinheiten p85α (PIK3R1), p55γ (PIK3R3) und p85β (PIK3R2) sind nicht-katalytische Adapter, die die p110-Katalysatoreinheit mit aktivierten Rezeptor-Tyrosinkinasen verbinden. p85α enthält zwei SH2-Domänen und eine SH3-Domäne, bindet phosphorylierte Tyrosinreste auf Rezeptoren wie FGFR, KIT, PDGFR und Integrin β2 (ITGB2) und vermittelt so die Rekrutierung und Aktivierung von PI3K an der Membran. Verwandte Referenzen: PMID:17626883 PMID:19805105 PMID:7518429
• Die p85α-Untereinheit spielt eine wesentliche Rolle bei der Insulinsignalübertragung, fördert die Glukoseaufnahme und Glykogensynthese in insulinempfindlichen Geweben und moduliert die zelluläre Reaktion auf ER-Stress, indem sie während metabolischer Überlastung in der Leber den nukleären Transport von XBP1-Isoform 2 erleichtert. Verwandte Referenzen: PMID:20348923
• Diese regulatorischen Untereinheiten existieren in mehreren Isoformen: PIK3R1 produziert durch alternatives Spleißen die Isoformen p85α, p55α und p50α, während PIK3R2 für p85β und PIK3R3 für p55γ kodiert. Isoform 2 (p50α) von PIK3R1 wird vorwiegend in Skelettmuskel und Gehirn exprimiert, in geringerem Maße in Niere und Herzmuskel.
• Subzellulär lokalisiert sich das p85α-Protein hauptsächlich im Zytoplasma, wo es sowohl mit Rezeptorkomplexen als auch mit der p110-Katalysatoreinheit interagiert.
• Posttranslationale Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, regulieren die Stabilität und Signalgebung von p85α; das Protein ist auch ein bekannter Wirtsfaktor für virale Interaktionen (SCHLÜSSELWÖRTER: Acetylierung, Phosphoprotein, Ubl-Konjugation, Wirt-Virus-Interaktion).
• Die vorhergesagten Molekulargewichte spiegeln die Isoformvielfalt wider: p85α und p85β wandern bei etwa 81–84 kDa, während die kürzeren Isoformen p55γ und p50α bei etwa 42–54 kDa nachgewiesen werden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen wurde unter Verwendung einer konservierten Peptidsequenz innerhalb der Aminosäuren 400–500 entworfen, die unter PIK3R1, PIK3R2 und PIK3R3 gemeinsam ist, wodurch die Erkennung mehrerer Isoformen der regulatorischen Untereinheit und die Kreuzreaktivität mit menschlichen, murinen und rattigen Proben ermöglicht wird.
• Für den Western Blot (WB) validieren Sie die Verdünnung des Primärantikörpers in Ihrem spezifischen ProbenSystem; ein Startbereich von 1:500–1:2000 wird häufig für Kaninchen-Polyklonale verwendet, aber die Optimierung ist entscheidend, um die erwarteten Banden bei ~42–54 kDa (p55γ/p50α) und ~81–84 kDa (p85α/p85β) aufzulösen.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) sollten Sie geeignete Kontrollen (z. B. nicht immunisiertes Kaninchen-IgG) einbeziehen und Permeabilisierungsprotokolle in Betracht ziehen, die zytoplasmatische Epitope erhalten.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; kombinieren Sie ihn mit einem geeigneten Antikörper gegen die p110-Katalysatoreinheit, um Sandwich-Formate zur Untersuchung der PI3K-Interaktionsdynamik einzurichten.

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