Anti-PI3-Kinase p85 beta Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O00459

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der PI3-Kinase p85 beta

• PI3-Kinase p85 beta (Phosphatidylinositol-3-Kinase regulatorische Untereinheit beta), kodiert durch das PIK3R2-Gen, ist eine 85 kDa regulatorische Untereinheit der Klasse IA PI3K.
• Sie assoziiert mit der katalytischen Untereinheit p110, um die aktive PI3K zu bilden, die PtdIns(4,5)P2 phosphoryliert, um den Second Messenger PIP3 an der Plasmamembran zu produzieren.
• PIP3 rekrutiert PH-Domänen enthaltende Proteine wie AKT1 und PDPK1 und aktiviert Signalkaskaden, die Zellwachstum, Überleben, Proliferation, Motilität und Morphologie steuern.
• Durch ihre SH2-Domäne bindet p85 beta an phosphorylierte Proteotyrosinkinasen (z. B. aktivierte Wachstumsfaktorrezeptoren) und fungiert als Adapter, um die katalytische Untereinheit p110 an die Membran zu lokalisieren.
• Es wurde gezeigt, dass sie indirekt die Autophagie reguliert (PubMed:23604317). Verwandte Referenzen: PMID:23604317
• p85 beta fördert die nukleäre Translokation von XBP1-Isoform 2 unter ER-Stress und/oder Insulinstimulation in der Leber und trägt so zur verbesserten Glukosetoleranz bei.
• Das Protein enthält SH2- und SH3-Domänen, wird nach PI3K-Aktivierung phosphoryliert und kann einer Ubiquitin-Konjugation unterliegen; Mutationen sind mit Krankheitsvarianten assoziiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (aa 1–85) des humanen p85 beta; diese Region kann weniger konserviert sein und möglicherweise Isoformspezifität bieten, aber die Kreuzreaktivität mit p85 alpha sollte in Betracht gezogen und im entsprechenden Probenystem validiert werden.
• Für WB verwenden Sie Ganzzelllysate aus humanen, murinen oder rattigen Zelllinien oder Geweben; die erwartete Bande liegt bei ca. 82 kDa. Eine Positivkontrolle (z. B. HeLa- oder NIH/3T3-Lysat) wird empfohlen.
• IHC-P und IF/ICC können eine Optimierung der Antigen-Retrieval (wärmeinduziertes Citratpuffer, pH 6,0) und Permeabilisierung (0,1 % Triton X-100) erfordern. Validieren Sie die Signalspezifität mit Blockierpeptid oder Knockout-Kontrollen.
• In ELISA kann dieser Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; eine Paarung mit einem geeigneten p85 beta-Detektionsantikörper ist für quantitative Assays erforderlich.
• Da p85 beta ein ubiquitär exprimiertes intrazelluläres Protein ist, stellen Sie eine ordnungsgemäße Fixierung und Permeabilisierung für IF/ICC sicher und erwägen Sie eine Co-Färbung mit kompartimentspezifischen Markern, um die Lokalisierung zu bestätigen.

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