Anti-PI3-Kinase p85 alpha Kaninchen mAb für WB, IF, IHC, ELISA – P27986

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von PI3-Kinase p85 alpha

• Das Gen PIK3R1 codiert die regulatorische p85-alpha-Untereinheit der Phosphoinositid-3-Kinase (PI3K), die mit einer katalytischen p110-Untereinheit ein Heterodimer bildet; alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen (z. B. Isoform 2 exprimiert in Skelettmuskel und Gehirn).
• p85-alpha fungiert als Adapter, der über seine SH2-Domänen an phosphorylierte Tyrosinreste aktivierter Rezeptor-Tyrosinkinasen (z. B. FGFR, KIT, PDGFR) und Adapterproteine bindet. Dadurch wird die katalytische p110-Untereinheit zur Plasmamembran rekrutiert, wo lokal PIP3 produziert wird. Verwandte Referenzen: PMID:7518429
• In insulinempfindlichen Geweben ist p85-alpha notwendig für die insulinstimulierte Glukoseaufnahme und Glykogensynthese und spielt eine entscheidende Rolle bei der Stoffwechselregulation.
• Das Protein vermittelt die Signalübertragung downstream von mehreren Wachstumsfaktorrezeptoren, darunter FGFR1–4, KIT, PDGFRA/B und Integrin ITGB2, und beeinflusst Zellwachstum, Überleben und Migration. Verwandte Referenzen: PMID:17626883, PMID:19805105, PMID:7518429
• Die subzelluläre Lokalisierung ist überwiegend zytoplasmatisch, mit stimulusabhängiger Translokation zur Plasmamembran.
• Das Protein erfährt umfangreiche posttranslationale Modifikationen – Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung – die seine Aktivität und Stabilität feinabstimmen.
• Bei Stress im Endoplasmatischen Retikulum (ER) fördert p85-alpha die nukleäre Translokation von XBP1 Isoform 2 in Abhängigkeit von Insulin oder ER-Stress, was zu einer verbesserten Glukosetoleranz bei metabolischer Überlastung beiträgt. Verwandte Referenzen: PMID:20348923
• Isoform 2 ist angereichert in Skelettmuskel und Gehirn, mit niedrigeren Gehalten in Niere und Herzmuskulatur; sowohl Isoform 2 als auch Isoform 4 werden auf Proteinebene im Skelettmuskel nachgewiesen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 240–380 ab, eine Region, die die inter-SH2 (iSH2)-Domäne enthält, die die Bindung an katalytische p110-Untereinheiten vermittelt; der Antikörper kann konservierte Epitope auf p85-Isoformen erkennen.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von p85-alpha ~84 kDa; validieren Sie mit Positivkontrollen wie insulinstimulierten HepG2- oder 3T3-L1-Lysaten und schließen Sie je nach Bedarf menschliche, Maus- oder Rattenproben ein.
• Für Immunhistochemie (IHC-P) sollten die Bedingungen zur Antigenretrieval optimiert werden; der Antikörper ist sowohl für gefrorene (IF-P) als auch für paraffineingebettete Gewebe geeignet.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC ist mit zytoplasmatischer Färbung zu rechnen, mit potenzieller Anreicherung an der Membran nach Wachstumsfaktorstimulation.
• Für ELISA-Anwendungen kann ein passendes Antikörperpaar von Vorteil sein; die Kreuzreaktivität gegenüber Mensch, Maus und Ratte erweitert den Anwendungsbereich in translationalen Modellen.

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