Anti-PI3-Kinase p110 delta Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – O00329

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der PI3-Kinase p110 delta

• Kodiert durch das Gen PIK3CD ist PI3-Kinase p110 delta die katalytische Untereinheit der Klasse-I-Phosphoinositid-3-Kinase-Delta-Isoform, die Phosphatidylinositol und seine Derivate an der 3-Position des Inositolrings phosphoryliert, um 3-Phosphoinositid-Sekundärbotenstoffe zu produzieren. Zugehörige Referenzen: PMID:9235916
• Speziell nutzt es ATP, um PtdIns(4,5)P2 (Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphat) in PIP3 (Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphat) umzuwandeln. Dies löst die Rekrutierung von PH-Domänen enthaltenden Proteinen wie AKT1 und PDPK1 zur Plasmamembran aus und aktiviert nachgeschaltete Signalkaskaden. Zugehörige Referenzen: PMID:15135396
• Das Protein wird überwiegend in Leukozyten exprimiert, mit den höchsten Gehalten in peripheren Blutmonozyten, Milz und Thymus; eine geringere Expression wird in Hoden, Gebärmutter, Dickdarm und Dünndarm beobachtet.
• Subzellulär lokalisiert sich PI3-Kinase p110 delta im Zytoplasma, wo es mit regulatorischen Untereinheiten und membrangebundenen Substraten interagiert.
• Es spielt wesentliche Rollen in der adaptiven und angeborenen Immunität, einschließlich B-Zellentwicklung, Proliferation, Migration und Antikörperklassenwechsel; T-Zell-Rezeptor-Signalgebung und Differenzierung; Reifung und Zytotoxizität von natürlichen Killerzellen (NK-Zellen) sowie Mastzellen-vermittelte allergische Reaktionen.
• Aufgrund von alternativem Spleißen existieren zwei Isoformen: Isoform 1 wird überwiegend in Leukozyten exprimiert, während Isoform 2 eine erhöhte Expression in einigen kolorektalen und ovariellen Tumoren zeigt und möglicherweise den gesamten RAS-Spiegel stabilisiert.
• Das Protein unterliegt Phosphorylierung und ist bei Mutationen mit der primären Immunschwächeerkrankung aktiviertes PI3K-Delta-Syndrom (APDS) verbunden.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus dem Bereich der Aminosäuren 200–300 des humanen Proteins; gleichen Sie die Immunogen-Sequenz mit Ihrer Zielspezies ab, um die Kreuzreaktivität für nicht aufgeführte Spezies zu bestätigen.
• Für Western Blotting (WB) erwarten Sie eine Bande bei etwa 119 kDa. Fügen Sie geeignete positive und negative Kontrollen hinzu und validieren Sie die Detektion mit einem bekannten Expressionssystem (z. B. Leukozytenlysate).
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) berücksichtigen Sie Antigen-Retrieval-Bedingungen, die auf zytoplasmatische Ziele abgestimmt sind, und optimieren Sie die Verdünnung des Primärantikörpers mit Gewebe, von dem bekannt ist, dass es das Protein exprimiert (z. B. Milz- oder Thymusschnitte).
• Für ELISA-Assays kombinieren Sie den Antikörper mit einem geeigneten Capture/Detection-Antikörper oder verwenden Sie ihn als Detektionsreagenz; validieren Sie mit rekombinantem Protein oder Zelllysaten.
• Als kaninchen monoklonaler Antikörper verwenden Sie ein anti-Kaninchen IgG Sekundärkonjugat für die Detektion in indirekten Formaten.

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