Anti-PI3-Kinase-p110-alpha-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA – P42336

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der PI3-Kinase p110 alpha

• Die PI3-Kinase p110 alpha, kodiert durch das PIK3CA-Gen, ist die katalytische Untereinheit mit einer Masse von 110 kDa des Klasse-I-Phosphoinositid-3-Kinase-(PI3K)-Komplexes und wird auch als p110alpha bezeichnet.
• Sie katalysiert die Phosphorylierung von Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphat (PIP2) zu Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphat (PIP3), einem wichtigen sekundären Botenstoff in zahlreichen Signalwegen. Verwandte Referenzen: PMID:15135396, PMID:28676499
• PIP3 rekrutiert Proteine mit Pleckstrin-Homologie-(PH)-Domäne wie AKT1 und PDPK1 an die Plasmamembran und löst nachgeschaltete Kaskaden aus, die Zellwachstum, Zellüberleben, Proliferation und Zellbeweglichkeit regulieren.
• Das Enzym wird durch Rezeptor-Tyrosinkinasen (RTKs) als Reaktion auf Wachstumsfaktoren wie EGF, Insulin, IGF1, VEGFA und PDGF aktiviert und spielt eine Schlüsselrolle bei der Insulinsignalisierung und Angiogenese.
• Neben der Lipidkinase-Aktivität weist die PI3K p110 alpha auch eine Serin-Proteinkinase-Aktivität auf, wobei sie die regulatorische p85-Untereinheit autophosphoryliert und Substrate wie 4EBP1 und H-Ras phosphoryliert. Verwandte Referenzen: PMID:23936502, PMID:28676499
• Das Protein ist für die Gefäßentwicklung und die Migration von Endothelzellen unerlässlich, insbesondere durch die VEGFA-Signalisierung und die Regulation der RhoA-Aktivität; außerdem ist es an Phagozytose und Pinozytose beteiligt.
• Schlüsselwörter weisen darauf hin, dass es sich um ein Protoonkogen mit krankheitsassoziierten Varianten handelt. Somatische Mutationen im PIK3CA-Gen werden häufig bei menschlichen Krebserkrankungen beobachtet, wodurch es zu einem wichtigen Biomarker und therapeutischen Ziel wird.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Beim Western Blot (WB) ist in Zell- oder Gewebelysaten von Mensch, Maus und Ratte eine spezifische Bande bei ungefähr 124 kDa zu erwarten. Überprüfen Sie die Proteinbeladung und die Effizienz des Transfers.
• Bei der Immunpräzipitation (IP) sollten die Anreicherung von p110 alpha und die Ko-Immunpräzipitation von Proteinen unter nativen Bedingungen validiert werden, wobei die Reaktivität des Antikörpers gegenüber der Immunogenregion (AS 294–610) zu berücksichtigen ist.
• Für ELISA sollten die Beschichtungsbedingungen und Antikörperkonzentrationen unter Verwendung von rekombinantem p110 alpha oder Zellextrakten optimiert werden; die Kreuzreaktivität mit Nagetierspezies ermöglicht Flexibilität bei verschiedenen Modellsystemen.
• Angesichts der Rolle des Zielmoleküls im PI3K/AKT-Signalweg sollte der Einsatz dieses Antikörpers in Tests zur Untersuchung von Zellproliferation, Zellüberleben oder der Analyse von Krebsbiomarkern in Betracht gezogen werden.
• Fügen Sie stets geeignete positive und negative Kontrollen ein, um die Spezifität zu bestätigen, insbesondere bei der Arbeit mit Proben, die andere PI3K-Isoformen enthalten können.

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