Anti-Phospholamban-(PLN)-polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P26678

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Phospholamban

• Phospholamban (PLN), auch als PLB bekannt, ist ein 52 Aminosäuren umfassendes Transmembranprotein, das die sarkoplasmatische Retikulum-Ca2+-ATPase (SERCA2) im Herzmuskel reversibel hemmt, indem es die scheinbare Affinität der Pumpe zu Calcium verringert und dadurch die kardiale Kontraktilität reguliert (PubMed:28890335). Verwandte Referenzen: PMID:28890335
• PLN bindet bevorzugt an den ATP-gebundenen E1-Konformationszustand von SERCA2, der bei diastolischen niedrigen Ca2+-Spiegeln vorherrscht, und stört die allosterische Aktivierung der Pumpe durch ATP.
• Die hemmende Funktion von PLN wird durch seinen oligomeren Zustand moduliert und nach der Phosphorylierung aufgehoben, wodurch die beta-adrenerge Stimulation mit einer verbesserten kardialen Relaxation verknüpft wird.
• Neben der kardialen SERCA2 hemmt PLN auch die Aktivität von ATP2A3/SERCA3 und erweitert damit seine regulatorische Rolle auf andere Gewebe und Prozesse, wie die Keimzelldifferenzierung und die Calciumhomöostase in verlängerten Spermatiden.
• Im Gehirn wird PLN im retikulären Thalamuskern exprimiert, wo es zur Regulierung von Schlafmustern und exekutiven Funktionen beiträgt.
• PLN ist hauptsächlich in den Membranen des sarkoplasmatischen/endoplasmatischen Retikulums und der Mitochondrien im Herzmuskel lokalisiert, wobei es zusätzlich in geringeren Mengen in glatter Muskulatur und anderen Geweben exprimiert wird.
• Klinisch stehen Mutationen im PLN-Gen mit Kardiomyopathien in Verbindung, was seine entscheidende Rolle in der kardialen Physiologie und bei Erkrankungen hervorhebt.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Der Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das der N-terminalen Region (Resten 1-52) entspricht. Für den Western Blot (WB) sollte sichergestellt werden, dass das Detektionssystem für kleine Proteine (Monomer ca. 6 kDa) optimiert ist – die Verwendung von Markern mit niedrigem Molekulargewicht, PVDF-Membranen und kurzen Transferzeiten sollte in Betracht gezogen werden.
• Für den ELISA kann das Peptid-Immunogen als Positivkontrolle dienen; der Assay sollte mit relevanten Gewebelysaten oder rekombinantem PLN validiert werden.
• Aufgrund der Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte kann dieser Antikörper für Studien an kardialem Gewebe von Nagetieren geeignet sein. Die artspezifische Reaktivität sollte jedoch im eigenen experimentellen System überprüft werden.
• Da die PLN-Funktion von der Phosphorylierung abhängt, sollten bei der Beurteilung des biologischen Zustands des Proteins mittels WB Phosphatase-Inhibitoren in den Lysepuffern in Betracht gezogen werden.

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