Anti-Phospho-YAP1-S127 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P46937

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: YAP1-Funktion und Lokalisation

• Der Transkriptionsregulator YAP1 (Yes-assoziiertes Protein 1, Yorkie-Homolog) ist eine Kernkomponente des Hippo-Signalwegs, wo er sowohl als Koaktivator als auch als Korepressor wirkt, um die Organgröße zu kontrollieren und Tumorbildung zu unterdrücken. Verwandte Referenzen: PMID:17974916 PMID:18280240
• Die LATS1/2-vermittelte Phosphorylierung an Ser127 fördert die zytoplasmatische Retention von YAP1 durch Erzeugung einer 14-3-3-Bindungsstelle, wodurch dessen nukleäre Translokation und transkriptionelle Aktivität gehemmt wird. Verwandte Referenzen: PMID:18158288 PMID:26598551 PMID:34404733
• Nukleäres YAP1 bindet TEAD-Transkriptionsfaktoren, um Gene zu regulieren, die an Zellproliferation, ankerunabhängigem Wachstum und epithelial-mesenchymaler Transition (EMT) beteiligt sind. Verwandte Referenzen: PMID:18579750
• YAP1 reguliert die 3D-Gewebemorphologie und die Aktomyosin-Kontraktilität über ARHGAP18 und wirkt als Korepressor, um die Ziliogenese durch Herunterregulierung der AURKA- und PLK1-Expression zu unterdrücken. Verwandte Referenzen: PMID:25778702 PMID:25849865
• YAP1 kooperiert mit WWTR1/TAZ, um den TGF-β/SMAD-Signalweg zu modulieren, und wirkt synergistisch mit WBP2, um die transkriptionelle Aktivität des Progesteronrezeptors zu verstärken. Verwandte Referenzen: PMID:16772533
• YAP1 lokalisiert überwiegend im Zytoplasma und translokiert bei Aktivierung in den Zellkern; es findet sich auch an Tight Junctions und der Zellmembran.
• Eine erhöhte YAP1-Expression ist mit Leber- und Prostatakrebs assoziiert, während N-terminal verkürzte Isoformen in Striatumneuronen bei der Huntington-Krankheit nachgewiesen werden.
• YAP1 wird als Phosphoprotein und Proto-Onkogen klassifiziert, was seine phosphorylierungsabhängige Regulation und onkogenes Potenzial widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für den phospho-spezifischen Nachweis sollten Sie während der Zelllyse und Probenvorbereitung immer Phosphatase-Inhibitor-Cocktails einschließen, um den Phosphorylierungsstatus von Ser127 zu erhalten.
• Überprüfen Sie die Phospho-Spezifität durch Behandlung der Proben mit Lambda-Phosphatase oder Kälberdarm-Phosphatase vor dem Immunoblotting.
• Für IHC-P optimieren Sie die Antigen-Retrieval-Methoden (z.B. Citratpuffer pH 6.0 oder EDTA pH 9.0), um Phospho-Epitop-Exposition und Gewebemorphologie auszubalancieren.
• Für IF/ICC permeabilisieren Sie Zellen mit 0,1–0,5 % Triton X-100 und verwenden Sie einen Blockierungspuffer, der mit der Phospho-Antikörper-Detektion kompatibel ist (z.B. 5 % BSA in TBST).
• Bei der Durchführung von ELISA sollten Sie ein nicht-phosphoryliertes Peptid als Negativkontrolle in Betracht ziehen, um die Spezifität zu validieren.
• Da es sich um einen polyklonalen Kaninchenantikörper handelt, verwenden Sie einen geeigneten Anti-Kaninchen-Sekundärantikörper und bestätigen Sie die optimalen Verdünnungen empirisch für jede Anwendung.

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