Anti-Phospho-VASP-S157 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IP, ELISA - P50552

Kernprodukt-Spezifikationen und -Parameter

Biologischer Hintergrund: VASP-Funktion und -Lokalisierung

• VASP (vasodilator-stimuliertes Phosphoprotein) ist ein Mitglied der Ena/VASP-Familie von aktinassoziierten Proteinen und spielt eine grundlegende Rolle bei der Remodellierung des Zytoskeletts.
• Es fördert das Wachstum von Aktinfilamenten, indem es die barbed ends wachsender Filamente vor Kappproteinen schützt und die Polymerisationsrate durch Profilin-Aktin-Transfer erhöht.
• VASP ist für Prozesse unerlässlich, die Zellpolarität und Motilität erfordern, einschließlich Axonführung, Lamellipodien- und Filopodiendynamik sowie Zellmigration.
• In Thrombozyten reguliert VASP kritisch die Aktindynamik, die für die Thrombozytenaktivierung und -aggregation erforderlich ist, ein Prozess von hoher physiologischer Relevanz.
• Subzellulär lokalisiert sich VASP im Zytoplasma, an Fokaladhäsionen, Tight Junctions sowie an den Spitzen von Lamellipodien und Filopodien, was konsistent mit seinen zytoskelettalen Funktionen ist.
• VASP ist ein Phosphoprotein; die Phosphorylierung an spezifischen Resten, einschließlich Ser157, moduliert seine Aktivität und subzelluläre Zielsteuerung.
• Hohe Expression in Thrombozyten, konsistent mit seiner Rolle in der Thrombozytenbiologie.
• Strukturell zeichnet sich VASP durch eine EVH1-Domäne, eine prolinreiche Region und eine EVH2-Domäne aus; seine Coiled-Coil-Region vermittelt die Tetramerisierung und sie enthält ein SH3-Bindungsmotiv.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Da dieser Antikörper eine Phosphorylierungsstelle targetiert, fügen Sie Lysepuffern für WB immer Phosphatasehemmer hinzu, um das Phosphosignal zu erhalten. Validieren Sie die Spezifität mithilfe von phosphatasebehandelten Kontrolllysaten oder Blockierpeptiden.
• Für WB sollten Sie einen anfänglichen Verdünnungsbereich von 1:500–1:2000 in Betracht ziehen und basierend auf Ihrem Probentyp optimieren. Thrombozytenlysate dienen aufgrund der hohen VASP-Expression als hervorragende positive Kontrollen.
• Für IHC-P ist eine Antigenretraktion mit Citratpuffer (pH 6,0) oft vorteilhaft. Fügen Sie geeignete Kontrollen hinzu, um die phosphospezifische Färbung zu bestätigen.
• Wenn Sie eine IP durchführen, verwenden Sie frisch zubereitete Lysate und bestätigen Sie die Effizienz der Immunpräzipitation, indem Sie die Blots mit einem Gesamt-VASP-Antikörper sondieren.
• Eine Kreuzreaktivität wird für Mensch, Maus und Ratte berichtet; überprüfen Sie die Leistung in Ihrer Zielspezies und Ihrem Gewebemodell.

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