Anti-Phospho-β-Catenin-S45 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P35222

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von β-Catenin

• β-Catenin (Catenin beta-1) ist ein Schlüssel-Downstream-Effektor des kanonischen Wnt-Signalwegs. In Abwesenheit von Wnt bildet es einen Abbaukomplex mit AXIN1/2, APC, CSNK1A1 und GSK3B, der seine N-terminalen Ser/Thr-Reste phosphoryliert, was zur Ubiquitinierung durch BTRC und zum proteasomalen Abbau führt. Bei Anwesenheit von Wnt-Liganden entgeht β-Catenin dem Abbau, reichert sich im Kern an und wirkt als Koaktivator für TCF/LEF-Transkriptionsfaktoren, um Wnt-Zielgene zu aktivieren.
  Verwandte Referenzen: PMID:17524503 PMID:18077326 PMID:18086858
• Über den Wnt-Signalweg hinaus fungiert β-Catenin auch als Transkriptionskoaktivator für andere Faktoren wie NR5A2 und fördert den epithelial-mesenchymalen Übergang (EMT), indem es CTNNB1/TCF-Zielgene antreibt.
  Verwandte Referenzen: PMID:22187462 PMID:29910125
• Als Bestandteil des E-Cadherin:Catenin-Adhäsionskomplexes vermittelt β-Catenin die Zell-Zell-Adhäsion an Adhäsionsverbindungen und verknüpft Cadherine mit dem Aktin-Zytoskelett.
• β-Catenin ist in mehreren zellulären Kompartimenten lokalisiert, einschließlich Zytoplasma, Kern, Adhäsionsverbindungen, Zellmembran, Zentrosom, Spindelpol und Synapse, was seine vielfältigen Rollen in Signalgebung, Adhäsion und Polarität widerspiegelt.
• Posttranslationale Modifikationen regulieren seine Stabilität und Aktivität: Phosphorylierung an N-terminalen Ser/Thr-Resten für den Abbau, Acetylierung, S-Nitrosylierung und Ubiquitinierung; es unterliegt auch einer Sumoylierung-vermittelten Regulation. Schlüsselwörter von UniProt umfassen Phosphoprotein, Glykoprotein und Ubl-Konjugation.
• Die Gewebeexpressionsanalyse zeigt β‑Catenin in Haarfollikelzelltypen (basale und periphere Matrix, äußere/innere Wurzelscheide), Dickdarm, kortikalen Neuronen und Brustkrebsgeweben.
  Verwandte Referenzen: PMID:29367600
• Das CTNNB1-Gen ist mit verschiedenen Krankheiten verbunden, einschließlich Krebs (durch Umstrukturierungen oder stabilisierende Mutationen), geistiger Behinderung und anderen Entwicklungsstörungen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches Phosphopeptid um Ser45 von humanem β‑Catenin hergestellt; es wird erwartet, dass er spezifisch β‑Catenin erkennt, das an Ser45 phosphoryliert ist, aber nicht das unmodifizierte Protein. Für die endogene Detektion fügen Sie während der Probenvorbereitung Phosphatase-Inhibitoren hinzu.
• Basierend auf den Daten des Lieferanten ist der Antikörper für Western Blot (WB) und ELISA-Anwendungen geeignet. Validieren Sie für WB die vorhergesagte Bande um 85 kDa in positiven Kontrolllysaten (z. B. Wnt-stimulierte oder GSK3-gehemmte Zellen).
• Der Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit murinem und rattigem β‑Catenin, was ihn über gängige Modellorganismen hinweg nützlich macht. Bestätigen Sie die Spezifität in Ihrem System immer durch die Verwendung von phosphatasebehandelten Proben oder spezifischen Blockierpeptiden.
• Da der Phosphorylierungsstatus von β‑Catenin mit der Zellbehandlung schnell ändert, sind eine sorgfältige zeitliche Planung des Experiments und der Zellhandhabung kritisch; erwägen Sie die Verwendung eines β‑Catenin-Stabilisierungsprotokolls, wenn auch die Gesamtspiegel verglichen werden müssen.
• Dieses Produkt wird auf Eis versandt, um die Aktivität zu erhalten; lagern Sie Aliquote bei den empfohlenen Temperaturen und vermeiden Sie Gefrier-Auftau-Zyklen.
• Für die ELISA optimieren Sie die Beschichtungskonzentrationen und Detektionsbedingungen unter Verwendung von Standard-Phospho-Peptid- im Vergleich zu Nicht-Phospho-Peptid-Kontrollen, um die Phospho-Stellen-Spezifität sicherzustellen.

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