Anti-Phospho-TrkA-Y674/675 + TrkB-Y706/707 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P04629-2 / Q16620

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: TrkA/TrkB-Funktion und Lokalisierung

• NTRK1 kodiert den hochaffinen Nervenwachstumsfaktor-Rezeptor, auch bekannt als TrkA, gp140trk und p140-TrkA.
• TrkA ist ein Rezeptor-Tyrosinkinase, der Neurotrophine bindet und eine kritische Rolle beim neuronalen Überleben, der Differenzierung und dem Wachstum spielt.
• Der Antikörper erkennt spezifisch die Phosphorylierung an den Tyrosinresten Y674 und Y675 von TrkA (Isoform TrkA-I, P04629-2) und die analogen Phosphorylierungsstellen Y706 und Y707 von TrkB (Q16620).
• TrkA existiert als mehrere Isoformen; die Isoform TrkA-I (als Immunogen-Referenz verwendet) hat ein Molekulargewicht von etwa 87 kDa, während das beobachtete Proteingewicht des Antikörpers zusätzliche Banden aufgrund von Glykosylierung und potenziellen Spaltprodukten einschließt (35 kDa, 53-60 kDa, 77 kDa, 83-93 kDa).
• TrkB (NTRK2) ist ein eng verwandter Neurotrophin-Rezeptor, der strukturelle und Phosphorylierungsstellen-Homologie mit TrkA teilt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das den Resten um Y674/Y675 von humanem TrkA entspricht. Überprüfen Sie die Reaktivität und Spezifität im relevanten Probensystem, z. B. NGF-stimulierten neuronalen Zelllinien.
• Für WB: Ziehen Sie die Verwendung von Phospho-spezifischen und Gesamtprotein-Kontrollen in Betracht, um die Bandenidentität zu bestätigen; eine Bande bei ~87 kDa (vollständige Länge TrkA) und niedrigere Molekulargewichtsbanden können beobachtet werden.
• Für ELISA: Optimieren Sie die Beschichtungsbedingungen mit phosphorylierten gegenüber nicht-phosphorylierten Peptiden, um die Phospho-Selektivität zu bewerten.
• Da der Antikörper auch die TrkB-Phosphorylierung erkennt, validieren Sie die Kreuzreaktivität durch Knockdown oder die Verwendung spezifischer Liganden (z. B. BDNF für TrkB-Aktivierung).

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