Anti-Phospho-TIFA-T9 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q96CG3

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des TRAF-interagierenden Proteins A mit FHA-Domäne

• TRAF-interagierendes Protein A mit FHA-Domäne (TIFA), auch bekannt als T2BP, T6BP oder TIFAA, wird vom TIFA-Gen (Gen-ID: 92610) kodiert und gehört zu einer Proteinfamilie, die an der angeborenen Immunsignalisierung beteiligt ist.
• Adaptermolekül, das eine Schlüsselrolle bei der Aktivierung der proinflammatorischen NF-kappa-B-Signalübertragung nach der Erkennung von bakteriellen pathogenassoziierten molekularen Muster-Metaboliten (PAMPs) spielt. Verwandte Referenzen: PMID:12566447, PMID:15492226, PMID:26068852
• Fördert die Aktivierung einer angeborenen Immunantwort durch Induzierung der Oligomerisierung und Polyubiquitinierung von TRAF6, was zur Aktivierung von TAK1 und IKK über einen proteasomenunabhängigen Mechanismus führt. Verwandte Referenzen: PMID:12566447, PMID:15492226, PMID:26068852
• Die TIFA-abhängige angeborene Immunantwort wird durch ADP-D-glycero-beta-D-manno-heptose (ADP-Heptose) ausgelöst, ein starkes PAMP, das in allen gramnegativen und einigen grampositiven Bakterien vorkommt: ADP-Heptose wird von ALPK1 erkannt, das TIFA an Thr-9 phosphoryliert, was zur Homooligomerisierung von TIFA und anschließenden Aktivierung der proinflammatorischen NF-kappa-B-Signalübertragung führt. Verwandte Referenzen: PMID:30111836
• Lokalisiert überwiegend im Zytoplasma, wo es mit vorgeschalteten Kinasen und nachgeschalteten Effektoren wie TRAF6 interagieren kann.
• Posttranslationale Phosphorylierung an Thr-9 ist ein kritischer Regulationsschritt, der TIFA in eine aktive Signalplattform umwandelt; weitere Phosphorylierungsstellen können existieren, wie durch seine Klassifizierung als Phosphoprotein angezeigt wird.
• Das Protein hat ein Molekulargewicht von etwa 21,4 kDa (berechnet aus der Sequenz) und ist Teil eines Netzwerks, das die Pathogenerkennung mit Entzündungsreaktionen verbindet.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid im Bereich von Thr-9 des menschlichen TIFA, was bedeutet, dass der Antikörper speziell für die Erkennung der an Thr-9 phosphorylierten Form von TIFA entwickelt wurde. Bestätigen Sie die Spezifität mit dephosphorylierten Kontrollen oder relevanten Inhibitoren.
• Für das Western Blotting beträgt die vorhergesagte Bandengröße ~21 kDa; erwägen Sie die Optimierung von Blockierungs- und Detektionsbedingungen, um unspezifische Bindung zu minimieren.
• Stellen Sie im ELISA sicher, dass das Peptid- oder Proteinantigen korrekt beschichtet ist und der Phosphorylierungszustand während der Probenvorbereitung erhalten bleibt.
• Da die Kreuzreaktivität nur für Mensch angegeben ist, validieren Sie den Antikörper in geeigneten menschlichen Zelllinien oder Gewebeproben, in denen die TIFA-Phosphorylierung induziert wird (z. B. nach ALPK1-Aktivierung durch ADP-Heptose).
• Dieser Antikörper ist für Anwendungen wie WB und ELISA geeignet; für andere Assayformate werden Pilotexperimente empfohlen, um die Leistung zu überprüfen.

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