Anti-Phospho-STAT1 (S727) Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P42224

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von STAT1

• STAT1 kodiert für den Signaltransduktor und Aktivator der Transkription 1, der durch alternatives Spleißen zwei Hauptisoformen (STAT1α/p91 und STAT1β/p84) entstehen lässt; auch bekannt als Komponenten p91/p84 des Transkriptionsfaktors ISGF-3.
• STAT1 ist ein zentraler Mediator der Interferon(IFN)-Signalgebung: Nach Bindung von Typ-I-IFN (IFN-α/β) bildet es mit STAT2 und IRF9 den ISGF3-Komplex, der antivirale Gene aktiviert; als Antwort auf Typ-II-IFN (IFN-γ) homodimerisiert es zu GAF und bindet an GAS-Elemente. Verwandte Referenzen: PMID:28753426 PMID:35568036 PMID:26479788 PMID:8156998
• Die Phosphorylierung von STAT1 an Ser727 verstärkt seine transkriptionelle Aktivität und ist entscheidend für volle biologische Antworten; diese Modifikation entsteht als Antwort auf Typ-II-IFN und andere Stimuli. Verwandte Referenzen: PMID:26479788
• STAT1 überträgt auch Signale von KITLG/SCF und Fibroblasten-Wachstumsfaktorrezeptoren (FGFR1-4). Verwandte Referenzen: PMID:15526160 PMID:19088846
• Nach LPS-induzierter Endozytose von TLR4 wird STAT1 an Thr-749 phosphoryliert, was zur transkriptionellen Aktivierung von ARID5A und IL12B führt. Verwandte Referenzen: PMID:32209697
• STAT1 shuttle zwischen Zytoplasma und Kern; unter Basalbedingungen lokalisiert es hauptsächlich im Zytoplasma und translokiert nach Aktivierung in den Kern.
• STAT1 unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, darunter Phosphorylierung (Tyr, Ser, Thr), Acetylierung, ADP-Ribosylierung, Methylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität, Interaktionen und Stabilität regulieren.
• Mutationen in STAT1 sind mit Erkrankungen des Immunsystems und primären Immundefizienzen verbunden.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches Phosphopeptid gerichtet, das Ser727 des menschlichen STAT1 umfasst; stellen Sie sicher, dass die Probenvorbereitung Phosphatase-Inhibitoren enthält, um den Phosphorylierungsstatus zu erhalten.
• Für die Western Blotting wandert das Zielprotein um 87 kDa; wählen Sie eine geeignete Gelkonzentration (z. B. 8–10 % SDS-PAGE) für eine optimale Trennung.
• Bei Immunhistochemie und Immunfluoreszenz validieren Sie die Färbemuster in bekannten positiven Kontrollgeweben oder Zelllinien und fügen Sie mit Phosphatase behandelte Kontrollen hinzu, um die Phosphospezifität zu bestätigen.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit murinem und Ratten-STAT1, aber überprüfen Sie die Reaktivität in Ihrem spezifischen experimentellen System, da die Erhaltung des Epitops variieren kann.
• Für ELISA kombinieren Sie ihn mit einem validierten Capture-Antikörper und verwenden Sie synthetische Phosphopeptid-Standards zur Quantifizierung; optimieren Sie Blockierungs- und Waschbedingungen sorgfältig.

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