Anti-Phospho-STAT1 (S727) Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P42224

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: STAT1-Funktion und -Lokalisation

• STAT1 (Signaltransduktor und Aktivator der Transkription 1) existiert als zwei alternativ gespleißte Isoformen, STAT1-alpha (p91) und STAT1-beta (p84), die sich in ihrer C-terminalen Transaktivierungsdomäne unterscheiden.
• Als zentraler Mediator der Interferon (IFN)-Signalübertragung wird STAT1 als Antwort auf Typ-I-IFNs tyrosinphosphoryliert, heterodimerisiert mit STAT2 und IRF9 zum ISGF3-Komplex und induziert antivirale Genexpression über ISRE-Elemente. Verwandte Referenzen: PMID:28753426, PMID:35568036
• Unter Typ-II-IFN (IFN-gamma)-Stimulation wird STAT1 sowohl an Tyrosin- als auch Serinresten phosphoryliert, homodimerisiert zu GAF und bindet GAS-Sequenzen, um Zielgene zu aktivieren. Verwandte Referenzen: PMID:8156998, PMID:26479788
• Die STAT1-Signalübertragung wird auch durch KITLG/SCF ausgelöst und könnte an FGFR-vermittelten Pfaden teilnehmen. Verwandte Referenzen: PMID:15526160, PMID:19088846
• In der angeborenen Immunität führt die TLR4-Endozytose nach LPS-Stimulation zur IKBKB-abhängigen Phosphorylierung von STAT1 an Thr-749, was die Transkription von ARID5A und IL12B antreibt. Verwandte Referenzen: PMID:32209697
• STAT1 ist primär zytoplasmatisch lokalisiert, unterliegt aber nach Aktivierung einer Kerntranslokation; sein subzelluläres Shuttling wird durch Phosphorylierung und andere posttranslationale Modifikationen wie Acetylierung, Methylierung und Ubiquitylierung reguliert.
• Die Phosphorylierung von Serin 727 in der Transaktivierungsdomäne ist für maximale transkriptionelle Aktivität essentiell. Dieser Antikörper erkennt spezifisch diese Modifikation und ermöglicht die Aufschlüsselung der STAT1-Aktivierungsdynamik.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Ser727 von humanem STAT1; stellen Sie sicher, dass die Probenvorbereitung Phosphataseinhibitoren enthält, um das Phospho-Epitop zu erhalten.
• Für Western Blot ist eine Bande nahe 87 kDa zu erwarten; ein Kontrollantikörper gegen nicht-phosphoryliertes STAT1 kann die Phospho-Spezifität bestätigen.
• Für Immunfluoreszenz (IF/ICC) optimieren Sie Fixierung und Permeabilisierung, um Antigenzugänglichkeit und Phospho-Epitoperhalt auszugleichen; Methanolfixierung kann vorteilhaft sein.
• Für Immunhistochemie (IHC-P) testen Sie Antigen-Retrieval-Bedingungen sorgfältig; ziehen Sie phospho-spezifische Kontrollen wie Lambda-Phosphatase-Behandlung in Betracht.
• Bei Verwendung von ELISA kann ein Phosphopeptid-Blockierungsexperiment die Signalspezifität validieren.
• Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-STAT1 ist angegeben; dennoch sollten Sie die Leistung in Ihrem spezifischen Modellsystem aufgrund möglicher speziesabhängiger Unterschiede in Sequenz oder Phosphorylierungsdynamik überprüfen.

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