Anti-Phospho-SRC Family (Y416) Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P12931 / P06241 / P06239 / P07947 / P08631 / P07948

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der SRC-Familienkinasen

• SRC ist eine nicht-rezeptorgebundene Proteintyrosinkinase, die nach der Aktivierung verschiedener zellulärer Rezeptoren, einschließlich Immunrezeptoren, Integrine, Rezeptor-Tyrosinkinasen, GPCRs und Zytokinrezeptoren, aktiviert wird und dadurch die Gentranskription, Immunantwort, Zelladhäsion, Zellzyklusfortschritt, Apoptose, Migration und Transformation reguliert.
  Verwandte Referenzen: PMID:34234773

• Sie gehört zur SRC-Kinasenfamilie, zu der FYN, LCK, YES1, HCK und LYN gehören; die funktionelle Redundanz zwischen diesen Mitgliedern erschwert die Zuweisung spezifischer Rollen, aber SRC ist oft die primäre Kinase, die nach der Rezeptoraktivierung aktiviert wird.

• SRC lokalisiert sich in mehreren subzellulären Kompartimenten, einschließlich der Zellmembran, fokalen Adhäsionen, Adhärensjunktionen, Gap Junctions, Zytoplasma, Zytoskelett, perinukleären Region, Kern und innerer Mitochondrienmembran, was es ihr ermöglicht, diverse Substrate an verschiedenen zellulären Orten zu phosphorylieren.

• Die Phosphorylierung des Tyrosins in der Aktivierungsschleife (Y419 in Isoform 1, entspricht Y416 im Peptidimmunogen) hebt die Autoinhibition auf und reguliert die Kinaseaktivität hoch, wodurch nachgelagerte Signalkaskaden eingeleitet werden.

• Ubiquitär exprimiert, zeigt SRC eine 5- bis 200-fach höhere Expression in Thrombozyten, Neuronen und Osteoklasten, wo es eine wesentliche Rolle bei der Hämostase, Neuroentwicklung und Knochenresorption spielt (Osteoklastenfunktion erfordert SRC-Kinaseaktivität und Komplexbildung mit PTK2B/PYK2).
  Verwandte Referenzen: PMID:22294297 PMID:14585963 PMID:8755529

• SRC phosphoryliert zahlreiche Substrate, einschließlich der fokalen Adhäsionskinase (FAK) und Paxillin an fokalen Adhäsionen, und koordiniert so Zelladhäsion und Migration.
  Verwandte Referenzen: PMID:21411625

• Neben seinen klassischen Rollen nimmt SRC an antiviralen Signalwegen teil, indem es RIG-I-vermittelte Antworten verstärkt, und erleichtert die EGFR-Internalisierung durch Phosphorylierung von Clathrin.
  Verwandte Referenzen: PMID:19419966 PMID:18586953

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen besteht aus einem synthetischen phosphorylierten Peptid, das Y416 der menschlichen SRC-Familie umgibt, einer Region, die über die Mitglieder der SRC-Familie hinweg hoch konserviert ist; dieses Design verleiht wahrscheinlich eine Pan-SRC-Familien-Phospho-Spezifität.
• Für Western Blots beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von SRC und seinen Familienmitgliedern ca. 60 kDa; überprüfen Sie die Bandspezifität mithilfe von Phosphatase-behandelten Lysaten oder Peptid-Wettbewerbsassays, um die Phospho-Abhängigkeit zu bestätigen.
• Obwohl für menschliche Proben validiert, wurde eine Kreuzreaktivität mit Ratte beobachtet; Benutzer sollten den Antikörper in ihrer Spezies und ihrem Gewebe von Interesse validieren, da Expressionsniveaus und posttranslationale Modifikationen variieren können.
• Erwägen Sie die Optimierung der Antikörperverdünnung und Blockierungsbedingungen für ELISA, um den Hintergrund zu minimieren, insbesondere bei der Arbeit mit komplexen Proben oder dem Nachweis phosphorylierter Zielstoffe mit geringer Häufigkeit.

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