Anti-Phospho-SQSTM1/p62-S349 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q13501

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SQSTM1/p62-Funktion und Lokalisation

• SQSTM1, auch bekannt als p62, fungiert als molekularer Adapter für selektive Makroautophagie (Aggrephagie) und überbrückt polyubiquitinierte Proteinaggregate und Autophagosomen über seine UBA- und LIR-Domänen. Verwandte Referenzen: PMID:15340068 PMID:15953362 PMID:16286508
• Nach der Bindung an ubiquitinierte Proteine über die UBA-Domäne durchläuft SQSTM1 eine Flüssig-Flüssig-Phasentrennung, um p62-Körper zu bilden, die dann für den autophagischen Abbau bestimmt sind. Verwandte Referenzen: PMID:15911346 PMID:20168092 PMID:22017874
• SQSTM1 dient auch als Signalzentrum, das die NFE2L2/NRF2-Antioxidansantwort aktiviert, indem es KEAP1 in Einschlusskörper sequestriert und so die nukleäre Akkumulation von NRF2 und die Expression zytoprotektiver Gene fördert. Verwandte Referenzen: PMID:20452972 PMID:28380357 PMID:33393215
• Subzellulär lokalisiert SQSTM1 in mehreren Kompartimenten, darunter Autophagosomen, zytoplasmatische Vesikel, PML-Körper im Zellkern, späte Endosomen, Lysosomen und das Sarkomer in Muskelzellen.
• Das Protein ist ein bekanntes Phosphoprotein, wobei die Phosphorylierung an verschiedenen Resten (einschließlich Ser349) seine Oligomerisierung, die Erkennung von Fracht und die Autophagie-Regulation beeinflusst.
• SQSTM1 ist in Geweben weit verbreitet und spielt eine Rolle bei neurodegenerativen Erkrankungen, Krebs und Immunsignalisierung.
• Es enthält mehrere funktionelle Domänen: PB1 (Polymerisation), ZZ-Typ-Zinkfinger, TB (TRAF6-bindend), LIR (LC3-interagierende Region) und UBA (ubiquitin-assoziiert), die vielfältige Protein-Protein-Interaktionen ermöglichen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Ser349, was darauf hindeutet, dass der Antikörper spezifisch an dieser Stelle phosphoryliertes SQSTM1 erkennt. Bestätigen Sie die Spezifität durch Phosphatase-Behandlung oder durch Vergleich der Signale in stimulierten vs. nicht stimulierten Zellen, falls angebracht.
• Für die Western-Blot-Analyse verwenden Sie ein reduzierendes SDS-PAGE-Gel und fügen Sie dem Lysepuffer frische Phosphatase-Inhibitoren hinzu, um die Phosphorylierung zu erhalten. Je nach Probe kann ein Band um 48–62 kDa beobachtet werden; SQSTM1 läuft aufgrund posttranslationaler Modifikationen oft höher.
• Für ELISA-Anwendungen erfordern ELISA-Assays oft eine Optimierung des Beschichtungs-pH-Werts und der Antikörperverdünnungen. Validieren Sie den linearen Bereich des Antikörpers mit bekannten phosphorylierten und nicht-phosphorylierten Peptid-Konkurrenten.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wird berichtet, was es für Studien im Nagetiermodell geeignet macht; überprüfen Sie dies stets in Ihrem spezifischen experimentellen System.

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