Anti-Phospho-SMO (S611/S615/S616) Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q99835

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von SMO

• SMO ist ein G-Protein-gekoppelter Rezeptor (GPCR), der den Hedgehog-Signalweg vermittelt, der für die Embryonalentwicklung und Zelldifferenzierung essenziell ist.
  Verwandte Referenzen: PMID:19592253, PMID:27437577, PMID:28344083

• In Abwesenheit von Hedgehog bleibt SMO durch Patched-Proteine (PTCH1/PTCH2) in einem inaktiven Zustand, die den Zugang von Cholesterin einschränken. Die Bindung von Hedgehog-Liganden an Patched hebt diese Hemmung auf und ermöglicht SMO die Translokation zur Membran des Primärziliums, wo Cholesterin bindet und SMO aktiviert. Dies löst die Kopplung an G(i)-Proteine aus, hemmt die Adenylatcyclase und senkt die intrazellulären cAMP-Spiegel.
  Verwandte Referenzen: PMID:27437577, PMID:28344083, PMID:31168089, PMID:32929279

• Verringerte cAMP-Spiegel mildern die proteinkinase A (PKA)-vermittelte Suppression und fördern die Freisetzung und nukleäre Translokation von GLI-Transkriptionsfaktoren (GLI1, GLI2, GLI3), die anschließend die Expression von Zielgenen aktivieren.
  Verwandte Referenzen: PMID:31168089

• Aktives SMO unterdrückt die PKA-Aktivität weiter, indem es direkt an seine katalytische Untereinheit (PRKACA) bindet und sie an der Zellmembran sequestriert, wodurch die Phosphorylierung und proteolytische Prozessierung von GLI-Transkriptionsfaktoren verhindert wird.
  Verwandte Referenzen: PMID:36202993, PMID:39138140

• SMO fördert die Entfernung von GPR161, einem konstitutiven Inhibitor des Signalwegs, aus den Primärzilien, was die Signaltransduktion weiter unterstützt.

• SMO befindet sich hauptsächlich an der Plasmamembran und der Membran des Primärziliums, was mit seiner Rolle bei der Signaltransduktion an diesen kritischen Signalknotenpunkten übereinstimmt.

• SMO unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Phosphorylierung, Glykosylierung und Lipidyierung, die zu seiner Regulation und Membranlokalisation beitragen.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches phosphoryliertes Peptid gerichtet, das die Reste S611, S615 und S616 umfasst; er erkennt spezifisch die phosphorylierte Form von humanem SMO. Zur Bestätigung empfehlen Sie eine Phosphatase-Behandlung oder den Vergleich mit einem nicht-phosphorylierten SMO-Antikörper in Ihrem Versuch.
• Die empfohlenen Anwendungen sind Western Blotting (WB) und ELISA. Für WB beträgt das vorausgesagte Molekulargewicht 86 kDa; validieren Sie den Antikörper mit relevanten menschlichen Zelllinien oder Geweben, von denen bekannt ist, dass sie aktives SMO exprimieren.
• Da die SMO-Phosphorylierung dynamisch ist und bei Aktivierung des Hedgehog-Signalwegs ansteigt, kann eine Stimulation mit Sonic Hedgehog (SHH) oder anderen Agonisten die Detektionsempfindlichkeit in Ihren Experimenten erhöhen.
• Kreuzreaktivität wurde für humanes SMO nachgewiesen; wenn Sie Proben anderer Spezies verwenden, überprüfen Sie vorher die Sequenzhomologie um die Phosphorylierungsstellen herum.

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