Anti-Phospho-RPA2 (T21) Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P15927

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RPA2-Funktion und Lokalisierung

• RPA2 (auch bekannt als REPA2, RPA32, RP-A p32, RP-A p34) ist die 32 kDa-Untereinheit des heterotrimeren Replikationsprotein A (RPA)-Komplexes, einem wichtigen Einzelstrang-DNA-bindenden Protein.
• Der RPA-Komplex bindet und stabilisiert ssDNA-Zwischenprodukte, die während der DNA-Replikation oder bei DNA-Stress entstehen, verhindert deren Rückhybridisierung und rekrutiert Proteine, die am DNA-Stoffwechsel beteiligt sind.
• In der zellulären Reaktion auf DNA-Schäden ist RPA2 essentiell für die Rekrutierung des ATRIP-ATR-Kinasekomplexes und von Reparaturfaktoren wie RAD51, RAD52, XPA, XPG und SMARCAL1 an das Chromatin.
• RPA2 trägt zur Nukleotidexzisionsreparatur (NER), Basenexzisionsreparatur (BER) durch Interaktion mit UNG bei und könnte auch eine Rolle bei der Telomererhaltung spielen.
• RPA stimuliert die 5'-3'-Helikaseaktivität von BRIP1/FANCJ, was den Neustart der Replikationsgabel und die DNA-Reparatur erleichtert. Verwandte Referenzen: PMID:17596542
• Die subzelluläre Lokalisierung ist überwiegend nukleär, mit Anreicherung in PML-Körpern.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung (Isopeptidbindung, Ubl-Konjugation), was seine dynamische Regulation widerspiegelt.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, und es wird als Referenzproteom-Phosphoprotein identifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid um T21 von humanem RPA2; der Antikörper erkennt voraussichtlich spezifisch die phosphorylierte T21-Form. Verwenden Sie geeignete Kontrollen (z.B. nicht-phosphoryliertes Peptid oder Phosphatase-behandelte Lysate), um die Spezifität zu bestätigen.
• Für die Western-Blot (WB)-Analyse beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von RPA2 etwa 29 kDa. Fügen Sie während der Probenvorbereitung Phosphataseinhibitoren hinzu, um die Phosphorylierung zu erhalten.
• Der Antikörper wurde in WB und ELISA eingesetzt. Optimieren Sie Verdünnungen und Bedingungen für Ihr spezifisches experimentelles System.
• Es wird über Kreuzreaktivität mit Human- und Rattenproben berichtet; validieren Sie die Leistung bei Bedarf in anderen Spezies.
• Erwägen Sie die Verwendung von Kernextrakten oder DNA-geschädigten Zellen, um die Detektion zu verbessern, angesichts der nukleären Lokalisierung von RPA2 und seiner Rolle in der DNA-Schadensantwort.

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