Anti-Phospho-RIPK1 (S166) Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q13546

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: RIPK1-Funktion und Lokalisierung

• RIPK1 ist eine Serin-Threonin-Kinase, die als Schlüsselregulator für TNF-vermittelte Apoptose, Nekroptose und Entzündungssignalwege fungiert [PMID:17703191, PMID:24144979, PMID:31827280]. Zugehörige Referenzen: PMID:17703191 PMID:24144979 PMID:31827280
• Die Kinaseaktivität von RIPK1 ist essentiell für die Regulierung des Zelltods, einschließlich der Assemblierung von apoptotischen und nekroptotischen Komplexen [PMID:11101870, PMID:19524512, PMID:19524513]. Zugehörige Referenzen: PMID:11101870 PMID:19524512 PMID:19524513
• RIPK1 besitzt auch kinase-unabhängige Gerüstfunktionen und fördert das Zellüberleben durch Aktivierung von NF-kappa-B, wenn es in den TNF-R1-Signalkomplex rekrutiert wird.
• Während der Embryonalentwicklung ist RIPK1 erforderlich, um Apoptose und Nekroptose zu hemmen und so einen fehlerhaften Zelltod zu verhindern.
• Das Protein lokalisiert sowohl im Zytoplasma als auch an der Zellmembran.
• RIPK1 unterliegt zahlreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Ubiquitinierung und proteolytischer Spaltung, welche seine überlebensfördernden oder zelltodfördernden Funktionen bestimmen.
• RIPK1 ist an der Entzündungsreaktion beteiligt und fördert die Produktion von proinflammatorischen Zytokinen wie IL-6 [PMID:31827280, PMID:31827281]. Zugehörige Referenzen: PMID:31827280 PMID:31827281

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid um Ser166 von humanem RIPK1; es wird erwartet, dass der Antikörper spezifisch RIPK1 erkennt, das an dieser Stelle phosphoryliert ist.
• Für Western Blot: Induzieren Sie die RIPK1-Phosphorylierung in Ihrem experimentellen System vor der Lyse mittels TNF oder anderen Stimuli. Erwägen Sie die Verwendung von Phosphatase-Inhibitoren im Lysepuffer.
• Validieren Sie die Spezifität durch Vergleich der Signale von Phosphatase-behandelten Proben oder durch Peptid-Kompetition mit dem nicht-phosphorylierten Kontrollpeptid.
• Für ELISA kann das Phosphopeptid als Beschichtungsantigen verwendet werden; bestätigen Sie die Signalreduktion nach Dephosphorylierung.
• Kreuzreaktivität mit Maus ist angegeben; überprüfen Sie den Nachweis in Mausgeweben oder -zellen und optimieren Sie die Antikörperverdünnung für jede Spezies.

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