Anti-Phospho-RET (Tyr905) Kaninchen-polyklonales Antikörper für WB & ELISA - P07949

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von RET

• RET (Protoonkogen-Tyrosinproteinkinase-Rezeptor Ret) gehört zur Cadherin-Superfamilie und fungiert als Rezeptor-Tyrosinkinase, die für die Aktivierung sowohl Ligand als auch Korezeptor benötigt.
  Verwandte Referenzen: PMID:21994944, PMID:23333276, PMID:28846097
• Es spielt eine wesentliche Rolle bei Zellproliferation, neuronale Navigation, Zellmigration und Differenzierung – insbesondere während der Entwicklung des enterischen Nervensystems und der Niere.
  Verwandte Referenzen: PMID:20064382, PMID:20616503, PMID:20702524, PMID:21994944
• Die RET-Signalübertragung wird durch Liganden der GDNF-Familie ausgelöst, die an GFRα-Korezeptoren binden. Dies führt zur Rezeptordimerisierung, Autophosphorylierung und Aktivierung der nachgeschalteten MAPK- und AKT-Signalwege.
  Verwandte Referenzen: PMID:21994944, PMID:23333276, PMID:24560924, PMID:28846097
• RET fungiert zudem als Abhängigkeitsrezeptor: Es fördert das Zellüberleben in Gegenwart des Liganden und induziert Apoptose bei dessen Abwesenheit; dieser Mechanismus ist entscheidend in Hypophysen-Somatotrophen und sympathischen Neuronen.
  Verwandte Referenzen: PMID:20616503, PMID:21357690
• Subzellulär ist RET an der Plasmamembran und der Endosomenmembran lokalisiert, wo die Signalübertragung aufrechterhalten oder moduliert werden kann.
• Als Phosphoprotein hängt die Kinaseaktivität von RET von der Autophosphorylierung wichtiger Tyrosinreste ab, einschließlich Tyr905 in der Kinasedomäne – dieser Schritt ist essenziell für die katalytische Aktivierung und Signalübertragung.
• Onkogene und funktionsverlierende Mutationen in RET sind mit multipler endokriner Neoplasie Typ 2A/2B (MEN2A, MEN2B) und dem Morbus Hirschsprung (HSCR1) verbunden, was seine klinische Bedeutung für neuroendokrine und entwicklungsbedingte Erkrankungen unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Fügen Sie Lysepuffern Phosphataseinhibitoren hinzu und minimieren Sie Gefrier-Auftau-Zyklen, um das Phosphorylierungssignal zu erhalten.
• Verwenden Sie GND-stimulierte Zelllinien (z. B. Neuroblastom- oder Schilddrüsenkarzinomzellen, die RET exprimieren) als Positivkontrolle für den Western Blot-Nachweis.
• Um die Phospho-Spezifität zu überprüfen, inkubieren Sie den Antikörper vorab mit dem phosphorierten Peptid-Immunogen; das Signal sollte durch das phosphorisierte Peptid blockiert werden, nicht jedoch durch das entsprechende nicht phosphorylierte Peptid.
• Aufgrund der großen Proteinmasse (124 kDa) empfehlen sich ein Gradienten- oder niedrigprozentiges SDS-PAGE-Gel sowie verlängerte Transferzeiten für optimale Auflösung und Transfereffizienz.

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