Anti-Phospho-RB-S780 Kaninchen monoklonaler Antikörper für IHC-P, ELISA - P06400

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des Retinoblastom-assoziierten Proteins (RB1)

• RB1 oder Retinoblastom-assoziiertes Protein ist ein Tumorsuppressor, der den G1/S-Zellzyklus-Checkpunkt eng steuert, indem er an E2F-Transkriptionsfaktoren bindet und diese hemmt (PubMed:10499802). Verwandte Referenzen: PMID:10499802
• Cyclin-abhängige Kinase (CDK)-vermittelte Phosphorylierung von RB1, einschließlich bei Ser780, führt zu dessen Dissoziation von E2F und dereprimiert Gene, die für den Eintritt in die S-Phase essentiell sind (PubMed:10499802). Verwandte Referenzen: PMID:10499802
• Phosphorylierung durch CDK3/Cyclin‑C treibt ebenfalls den G0‑G1-Übergang an (PubMed:15084261). Verwandte Referenzen: PMID:15084261
• RB1 trägt zur Heterochromatin-Stabilität bei, indem es Histone-Methyltransferasen (SUV39H1, KMT5B/C) rekrutiert und die H4K20-Trimethylierung steuert.
• Subzellulär ist RB1 vorwiegend nukleär, kann aber ins Zytoplasma shuttle; es wird in der Retina und in Keratinozyten exprimiert.
• Posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung, Acetylierung und Methylierung steuern seine Repressoraktivität und Proteininteraktionen fein.
• Virale Onkoproteine (SV40 großes T, HPV E7, Adenovirus E1A) stören RB1‑E2F-Komplexe und heben die tumorunterdrückende Funktion auf.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phospho‑Peptid, das Ser780 von humanem RB1 umfasst. Für IHC‑P sollten Sie die Antigen-Retrieval und Phosphatase-Inhibitoren in Betracht ziehen, um die Phosphorylierung zu erhalten.
• Bestätigen Sie die Spezifität durch einen Vergleich der Färbung mit einem nicht‑phospho‑spezifischen RB1-Antikörper oder durch Phosphatase-Behandlung.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus und Ratte; validieren Sie ihn im entsprechenden Gewebe- oder Zellmodell für Ihre Studie.
• Für ELISA sollten Sie sowohl phosphorylierte als auch unphosphorylierte Peptidkontrollen einschließen, um die Phospho‑Spezifität zu bewerten.
• Da RB1 ein Kernprotein ist, können Schritte zur Kernanreicherung die Empfindlichkeit der Detektion verbessern.

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