Anti-Phospho-PTEN-S380/T382/T383 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA – P60484

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PTEN

• PTEN ist eine Proteinphosphatase mit doppelter Spezifität, die tyrosine-, serin- und threoninphosphorylierte Proteine dephosphoryliert. Es wirkt zudem als Lipidphosphatase mit Präferenz für PtdIns(3,4,5)P3 und antagonisiert dadurch den PI3K-AKT-Signalweg. Verwandte Referenzen: PMID:9187108, PMID:9256433, PMID:9616126, PMID:16824732, PMID:26504226, PMID:9593664
• Es fungiert als Tumorsuppressor, indem es den Zellzyklusverlauf hemmt und die Apoptose durch seine doppelte Phosphataseaktivität fördert; die im Kern vorliegende monoubiquitinierte Form weist ein höheres Apoptosepotenzial auf. Verwandte Referenzen: PMID:10468583, PMID:18716620
• PTEN reguliert Zellmigration und Polarität: nicht phosphoryliertes PTEN kooperiert mit MAGI2 zur Hemmung der AKT1-Aktivierung und dephosphoryliert Fokalkontaktkinase, um Zellmigration und Integrin-vermittelte Ausbreitung zu hemmen. Die Stimulation mit Wachstumsfaktoren induziert die Phosphorylierung von PTEN, wodurch sich seine Bindungspräferenz zu DLC1 verschiebt und die RHOA-Aktivierung am hinteren Pol wandernder Zellen gefördert wird. Verwandte Referenzen: PMID:11707428, PMID:22279049, PMID:26166433
• Im Nervensystem ist PTEN an der adulten Neurogenese beteiligt und steuert die Integration neu geborener Neuronen, die Dendritenentwicklung und die Synapsenbildung. Es wird nach Aktivierung von NMDA-Rezeptoren an postsynaptische Membranen rekrutiert und ist für die Langzeitdepression (LTD) erforderlich.
• Das Protein lokalisiert sich im Zytoplasma, Zellkern, an PML-Körperchen, in Dendritenstacheln und der postsynaptischen Dichte; es wird zudem sezerniert.
• Es wird in relativ hohen Mengen in allen adulten Geweben exprimiert, darunter Herz, Gehirn, Plazenta, Lunge, Leber, Muskel, Niere und Bauchspeicheldrüse.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung (es handelt sich um ein Phosphoprotein), Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität und subzelluläre Lokalisation regulieren.
• PTEN ist an Erkrankungen wie Autismus-Spektrum-Störungen und Krebs beteiligt; alternatives Spleißen erzeugt Isoformen wie PTENbeta.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid im Bereich um S380 und T383, was die Spezifität für die phosphorylierte Form gewährleistet. Für den Nachweis von Gesamt-PTEN sollte ein Pan-PTEN-Antikörper verwendet werden.
• Für Western Blot (WB) liegt die erwartete Bande bei ~47 kDa (menschliches PTEN); validieren Sie die Reaktion im entsprechenden Zell- oder Gewebelysat und fügen Sie während der Probenvorbereitung Phosphataseinhibitoren hinzu, um die Phosphorylierung zu erhalten.
• Für Immunfluoreszenz (IF-P) und Immunhistochemie (IHC-P) optimieren Sie die Bedingungen für Fixierung und Permeabilisierung; verwenden Sie geeignete Kontrollen wie Peptidkompetition oder Phosphatasebehandlung, um die Phospho-Spezifität zu bestätigen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Fang- oder Nachweisreagenz verwendet werden; für die Sandwich-ELISA zur Quantifizierung von Phospho-PTEN-Spiegeln kombinieren Sie ihn mit einem geeigneten nicht-phosphorylierten Antikörper.

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