Anti-Phospho-PPP1CA (T320) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P62136

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: PPP1CA-Funktion und Lokalisierung

• Proteinidentität und Holoenzymbildung: Katalytische Untereinheit der Serin/Threonin-Proteinphosphatase PP1-alpha, die sich mit über 200 regulatorischen Proteinen verbindet, um substratspezifische Holoenzyme zu bilden und hunderte biologische Ziele zu dephosphorylieren (PubMed:28216226, 30158517, 35768504).
  Verwandte Referenzen: PMID:28216226, PMID:30158517, PMID:35768504

• Kernfunktionen der Zelle: Wesentlich für Zellteilung, Transkriptionsverlängerung, Glykogenstoffwechsel, Muskelkontraktilität und Proteinsynthese (PubMed:35768504, 35830882, 35831509). Reguliert auch Ionenleitfähigkeiten, langfristige synaptische Plastizität und postsynaptische CaMKII-Dephosphorylierung.
  Verwandte Referenzen: PMID:35768504, PMID:35830882, PMID:35831509

• Transkriptionsregulation durch PNUTS-PP1-Komplex: Katalytische Komponente des PNUTS-PP1-Komplexes, der die Freisetzung und Beendigung der RNA-Polymerase II vermittelt, indem er Faktoren wie AFF4, CDK9, SUPT5H dephosphoryliert (PubMed:39603239, 39603240, 31677974). Fördert auch den Abbau von RNAPII bei Replikationsstress und reguliert die Chromatinstruktur während des Mitose-Interphase-Übergangs (PubMed:33264625, 20516061).
  Verwandte Referenzen: PMID:39603239, PMID:39603240, PMID:31677974, PMID:33264625, PMID:20516061

• Subzelluläre Lokalisierung: Im Zytoplasma, Kern (Nukleoplasma und Nukleolus) und an der postsynaptischen Dichte zu finden, was konsistent mit ihren vielfältigen regulatorischen Rollen ist.

• Posttranslationale Modifikationen und Metallbindung: Ein Phosphoprotein und acetyliertes Protein, das Mangan (Mn²⁺) als Kofaktor für seine Hydrolaseaktivität benötigt.

• Beteiligung an wichtigen Signalwegen: Wirkt als Kernphosphatase im SHOC2-MRAS-PP1c (SMP)-Komplex, um RAF-Kinasen zu dephosphorylieren und zu aktivieren und den MAPK-Weg zu stimulieren (PubMed:35768504, 35830882, 35831509, 36175670). Dephosphoryliert auch FOXP3 in Treg-Zellen, CENPA, ATG16L1 sowie die angeborenen Immunrezeptoren IFIH1/MDA5 und RIG-I (PubMed:23396208, 25556658, 26083323, 23499489).
  Verwandte Referenzen: PMID:35768504, PMID:35830882, PMID:35831509, PMID:36175670, PMID:23396208, PMID:25556658, PMID:26083323, PMID:23499489

• Zusätzliche biologische Rollen: Reguliert den zirkadianen Rhythmus durch Balance der CSNK1D/E-Aktivität und PER-Phosphorylierung (PubMed:21712997). Auch an der Embryonalentwicklung beteiligt (Verschluss des Neuralrohrs, Verschluss der Augenspalte, ENCC-Migration; nach Ähnlichkeit) und notwendig für die Replikation von Alphaviren.
  Verwandte Referenzen: PMID:21712997

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Thr320 von menschlichem PPP1CA hergestellt; die spezifische Detektion von phosphoryliertem PPP1CA an dieser Stelle erfordert, dass die Phosphorylierung während der Probenvorbereitung erhalten bleibt. Erwägen Sie die Zugabe von Phosphatase-Inhibitoren zu den Lysepuffern.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ca. 38 kDa; eine Bande in der Nähe dieser Größe wird in relevanten Proben erwartet. Unspezifische Banden können je nach Probentyp und Antikörperkonzentration auftreten; eine Optimierung der Verdünnung des Primärantikörpers wird empfohlen.
• Für IHC-P sollten die Bedingungen der Antigen-Retrieval und die Antikörperverdünnung je nach Gewebetyp optimiert werden. Für ELISA sollte die Verwendung eines nicht-phosphorylierten Peptidkontrolls in Betracht gezogen werden, um die Spezifität zu bestätigen.

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