Anti-Phospho-POLR2A CTD-S7 Kaninchen pAb für WB, IHC-P, ELISA, ChIP - P24928

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von POLR2A

• POLR2A, auch bekannt als RPB1 oder POLR2, ist die größte Untereinheit der RNA-Polymerase II (Pol II), einer DNA-abhängigen RNA-Polymerase, die für die Synthese von mRNA-Vorläufern und vielen funktionellen nicht-kodierenden RNAs verantwortlich ist.
• Es bildet zusammen mit der zweitgrößten Untereinheit POLR2B das katalytische Zentrum, das ein Mg²⁺-koordinierendes DxDGD-Motiv für die Nukleotidpolymerisation und eine 3'→5'-Exonukleaseaktivität für die Korrekturlesung verwendet. Verwandte Referenzen: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:30190596, PMID:8381534, PMID:9852112
• Die einzigartige C-terminale Domäne (CTD) besteht aus 52 tandemartigen Heptapeptid-Wiederholungen (YSPTSPS) und dient als Plattform für Transkriptionsregulatoren. Die Phosphorylierung an Ser5 erleichtert das Promotor-Escape, während die Ser2-Phosphorylierung für die Pausenfreisetzung und Elongation erforderlich ist. Verwandte Referenzen: PMID:24207025, PMID:26124092
• Die Acetylierung von CTD-Lysin aktiviert wachstumsfaktorinduzierte unmittelbare Frühgene, während Methylierung und Dimethylierung die Expression von Zielgenen hemmen und das Transkriptionsergebnis feinabstimmen. Verwandte Referenzen: PMID:24207025, PMID:26124092
• POLR2A lokalisiert hauptsächlich im Zellkern, wird aber auch im Zytoplasma und auf Chromosomen nachgewiesen, was seiner dynamischen Rolle bei der Transkription entspricht.
• Es wirkt als RNA-abhängige RNA-Polymerase, die nicht-kodierende RNAs verlängert und kann als Replikase für das Hepatitis-Delta-Virus fungieren.
• Schlüsselwörter, die mit POLR2A verbunden sind, umfassen Phosphoprotein, Acetylierung, Methylierung, DNA-bindend, metallbindend, Transkription, Wirt-Virus-Interaktion und Krankheitsvariante, was seine komplexe Regulation widerspiegelt.
• Mutationen in POLR2A sind mit neurologischen Entwicklungsstörungen wie geistiger Behinderung (NEDHIB) verbunden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Verwenden Sie für Western Blot ein SDS-PAGE-Gel mit niedrigem Prozentanteil (z. B. 6 % oder Gradienten) und einen Nassblottransfer, um einen effizienten Transfer des 217 kDa großen Proteins sicherzustellen.
• Fügen Sie Phosphatase-Inhibitor-Cocktails zu Lyspuffern hinzu, um das S7-Phosphorylierungssignal zu erhalten; erwägen Sie die Verwendung eines nicht-phosphorylierten Peptids oder einer phosphatase-behandelten Probe als Negativkontrolle.
• Optimieren Sie bei IHC-P die Bedingungen für die Antigen-Retrieval (Puffer auf Zitrat- oder EDTA-Basis) und verwenden Sie ein Polymer-Nachweissystem zur Signalverstärkung.
• Verwenden Sie bei ELISA das Phospho-Peptid als Positivkontrolle und das entsprechende nicht-phosphorylierte Peptid zur Bestätigung der Spezifität.
• Kreuzen Sie bei ChIP Proteine an DNA und scheren Sie Chromatin zu 200–500 bp großen Fragmenten; der Antikörper kann Pol II an Promotoren aktiv transkribierter Gene anreichern.
• Validieren Sie die Antikörperleistung in der relevanten Spezies- und Gewebeumgebung vor großangelegten Experimenten.

CamelBio: Ihre One-Stop-Beschaffungsbrücke

CamelBio bietet Diagnostikherstellern und Forschern eine One-Stop-Plattform für IVD-Rohstoffe und unterstützt Projekte von der Konzeption bis zur Klinik. Dieser polyklonale Anti-Phospho-POLR2A CTD-S7-Antikörper deckt den Bedarf an Reagenzien für die Transkriptionsforschung ab, und unser Portfolio umfasst validierte Antikörperpaare, optimierte monoklonale Antikörper, Bulk-Hilfsreagenzien und maßgeschneiderte Beschaffung für seltene Targets. Arbeiten Sie mit CamelBio zusammen, um Ihre Beschaffung zu optimieren und die Assay-Entwicklung zu beschleunigen.