Anti-Phospho-POLR2A CTD-S5 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P24928

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: POLR2A (RPB1) Funktion und Lokalisierung

• Als größte Untereinheit der RNA-Polymerase II bildet POLR2A/RPB1 den katalytischen Kern, der für die DNA-abhängige RNA-Synthese verantwortlich ist, und transkribiert mRNA-Vorstufen und nicht-kodierende RNAs (PubMed:23748380, PubMed:27193682, PubMed:30190596). Verwandte Referenzen: PMID:23748380 PMID:27193682 PMID:30190596

• Zusammen mit der Untereinheit POLR2B/RPB2 bildet es das aktive Zentrum, das ein Mg2+-koordinierendes DxDGD-Motiv aufweist, und stellt eine 3'→5' Exonuklease-Korrekturlesefunktion sicher, um die transcriptionale Genauigkeit zu gewährleisten (PubMed:30190596, PubMed:8381534, PubMed:9852112). Verwandte Referenzen: PMID:30190596 PMID:8381534 PMID:9852112

• Die C-terminale Domäne (CTD) besteht aus 52 tandemartigen Heptapeptid-Wiederholungen (YSPTSPS) und unterliegt einer dynamischen Phosphorylierung: Die Phosphorylierung von Ser5 (Ziel dieses Antikörpers) fördert den Promoter-Austritt, während die Phosphorylierung von Ser2 die Elongation und die mRNA-Verarbeitung erleichtert (PubMed:24207025, PubMed:26124092). Verwandte Referenzen: PMID:24207025 PMID:26124092

• Über seine DNA-abhängige Rolle hinaus zeigt POLR2A RNA-abhängige RNA-Polymerase-Aktivität, trägt zum Stoffwechsel nicht-kodierender RNA bei und fungiert als Replikase für das Hepatitis-Delta-Virus.

• POLR2A ist hauptsächlich im Zellkern lokalisiert, wandert aber auch ins Zytoplasma und assoziiert mit mitotischen Chromosomen, was seine vielfältigen regulatorischen Rollen widerspiegelt.

• Mutationen in POLR2A sind mit einer neuroentwicklungsbedingten Störung mit Hypotonie, geistiger Behinderung und charakteristischen Gesichtszügen (NEDHIB) verbunden, was seine wesentliche Rolle für die menschliche Entwicklung unterstreicht.

• Post-translationale Modifikationen der CTD, einschließlich der Acetylierung und Methylierung von Lysinresten, bieten eine zusätzliche regulatorische Ebene für die Genexpression, wobei die Acetylierung für die Aktivierung unmittelbar früher Gene entscheidend ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das speziell darauf ausgelegt ist, den phosphorylierten Ser5-Rest im Kontext der CTD-Wiederholung zu erkennen; die Kreuzreaktivität mit nicht-phosphoryliertem Peptid oder anderen Phospho-Epitopen (z. B. Ser2, Ser7) sollte im entsprechenden Probenystem bewertet werden.
• Für die Western-Blot-Analyse (WB) wird ein Hauptband bei ~217 kDa erwartet, das der vollständigen Länge von POLR2A entspricht; Fügen Sie Phosphatase-Inhibitoren den Lysis- und Elektrophoresepuffern hinzu, um das Phospho-Epitop zu erhalten.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) können Antigen-Retrieval-Methoden die Stabilität des Phospho-Epitops beeinträchtigen; Testen Sie milde Citrat- oder EDTA-basierte Protokolle und validieren Sie diese mit geeigneten positiven und negativen phosphorylierten Kontrollen.
• ELISA-Anwendungen erfordern möglicherweise eine Beschichtung mit phosphoryliertem Peptid und eine Blockierung unter Bedingungen, die die Antikörperspezifität für das Phospho-Antigen aufrechterhalten.
• Eine Kreuzreaktivität wird für Proben von Mensch, Maus und Ratte berichtet; Da die CTD-Wiederholungssequenz jedoch hochkonserviert ist, überprüfen Sie bei Bedarf die Spezifität in Ihrem spezifischen Modellorganismus durch einen Sequenzabgleich.

CamelBio: Ihre One-Stop-Beschaffungsbrücke

CamelBio fungiert als vertrauenswürdiger One-Stop-Partner für die Beschaffung von IVD-Rohmaterialien und unterstützt Diagnostika-Hersteller, Forschungslabore und Institute vom ersten Konzept bis zur klinischen Bereitschaft. Der Phospho-POLR2A CTD-S5-Antikörper ist Teil unseres wachsenden Portfolios für die Transkriptionsregulations- und Epigenetikforschung, ergänzt durch validierte Antikörperpaare, optimierte monoklonale und polyklonale Antikörper, Hilfsreagenzien in Bulk und das Custom Sourcing für seltene Ziele. Kontaktieren Sie uns, um Ihre spezifischen Anforderungen zu besprechen und zu erfahren, wie unsere integrierte Lieferkette Ihren Entwicklungsprozess optimieren kann.