Anti-Phospho-PKR/EIF2AK2-T446 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P19525

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: PKR/EIF2AK2 Funktion und Lokalisierung

• IFN-induzierte dsRNA-abhängige Serin/Threonin-Proteinkinase, die EIF2S1/eIF-2-alpha phosphoryliert, was zur Hemmung der globalen Translation führt und eine Schlüsselrolle in der angeborenen Immunantwort auf virale Infektionen spielt. Verwandte Referenzen: PMID:18835251 PMID:19189853 PMID:19507191

• Hemmt die virale Replikation über die integrierte Stressantwort (ISR), indem sie EIF2S1 in einen globalen Translationshemmer umwandelt und die ATF4-Translation fördert; entfaltet eine breite antivirale Aktivität gegen DNA- und RNA-Viren, einschließlich HCV, HBV, Masernvirus und HSV-1. Verwandte Referenzen: PMID:19189853 PMID:21123651 PMID:22948139 PMID:11836380 PMID:19840259

• Phosphoryliert verschiedene Substrate, einschließlich p53/TP53, PPP2R5A, DHX9, ILF3, IRS1 und dem viralen Protein US11, und reguliert so die Signaltransduktion, Apoptose, Zellproliferation und Differenzierung. Verwandte Referenzen: PMID:11836380 PMID:19229320 PMID:22214662

• Fungiert auch als Tyrosin-Proteinkinase, phosphoryliert CDK1 bei Tyr-4 als Reaktion auf DNA-Schäden, um dessen Ubiquitinierung und proteasomalen Abbau zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:20395957

• Moduliert mehrere Signalwege: aktiviert NF-kappa-B durch Interaktion mit IKBKB und TRAF-Familienproteinen, aktiviert p38-MAP-Kinase über MAP2K6 und reguliert Transkriptionsfaktoren (JUN, STAT1/3, IRF1, ATF3), die an der Expression proinflammatorischer Zytokine und IFN beteiligt sind. Verwandte Referenzen: PMID:22948139 PMID:23084476 PMID:23372823 PMID:10848580 PMID:15121867 PMID:15229216

• Wirkt als dualer Regulator des Insulin-Signalwegs: negativ durch hemmende Phosphorylierung von IRS1 bei Ser-312 und positiv durch Phosphorylierung von PPP2R5A, welches FOXO1 aktiviert und IRS2 hochreguliert. Verwandte Referenzen: PMID:20685959

• Reguliert die Montage und Aktivierung von NLRP3-, NLRP1-, AIM2- und NLRC4-Inflammasomen. Verwandte Referenzen: PMID:22801494

• Überwiegend zytoplasmatisch mit nukleärer und perinukleärer Lokalisierung; hochexprimiert in Thymus, Milz und Knochenmark; erhöhte Spiegel in Brust- und Dickdarmkarzinomen korrelieren mit dem Tumorfortschritt; kolokalisiert mit GSK3B und TAU im Gehirn bei Alzheimer-Krankheit.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid um Thr446; Phosphatase-Inhibitoren in Lysepuffern sind entscheidend, um die Phosphorylierung während der Probenvorbereitung zu erhalten.
• Für Western Blots validieren Sie die Phospho-Spezifität, indem Sie Signale von phosphataseten behandelten gegenüber unbehandelten Lysaten vergleichen oder eine Kontrolle mit nicht-phosphoryliertem Peptid (Blocking) verwenden.
• Bei der Immunfluoreszenz sollten Sie die Antigen-Retrieval-Bedingungen berücksichtigen und einen nukleären Gegenfärbestoff einschließen, um die zytoplasmatische/perinukleäre Verteilung zu visualisieren.
• Bei der Anwendung von ELISA kombinieren Sie es mit einem Gesamt-PKR-Antikörper, um die Proteinmenge zu normalisieren und die Phosphorylierungsverhältnisse zu bewerten.
• Eine Kreuzreaktivität wird für Mensch und Maus berichtet; überprüfen Sie die Leistung in anderen Spezies vor der Verwendung.

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