Anti-Phospho-PKC (pan) (βII Ser660) monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P17252 / P05771 / Q05655 / Q02156 / P24723 / Q04759

Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PKC (pan)

• Protein-Kinase C alpha (PRKCA) ist eine calciumaktivierte, Phospholipid- und Diacylglycerol (DAG)-abhängige Serin/Threonin-Proteinkinase, die verschiedene zelluläre Prozesse reguliert, darunter Proliferation, Apoptose, Differenzierung, Migration und Adhäsion.
• Sie spielt eine Rolle bei der Chemokin-induzierten T-Zell-Migration durch Phosphorylierung von DOCK8, was zur CDC42-Aktivierung führt. Zugehörige Referenzen: PMID:28028151
• PRKCA ist an der Angiotensin-II-Signalübertragung beteiligt, indem sie KLHL3 phosphoryliert, was WNK4-Interaktionen und die Blutdruckregulation moduliert. Zugehörige Referenzen: PMID:25313067
• Sie phosphoryliert LRRK1, welches wiederum RAB-Proteine phosphoryliert, die am intrazellulären Transport beteiligt sind. Zugehörige Referenzen: PMID:36040231
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst je nach zellulärem Kontext und Stimuli das Zytoplasma, die Zellmembran, die Mitochondrienmembran und den Zellkern.
• Die PKC-Familie umfasst mehrere Isoformen; dieser Antikörper, der gegen ein phosphoryliertes Peptid um Ser660 von PRKCA generiert wurde, erkennt aufgrund der Sequenzkonservierung im Turn-Motiv phosphorylierte Formen mehrerer PKC-Isoformen (alpha, beta, delta, epsilon, eta, theta).
• PKC alpha enthält regulatorische C1- und C2-Domänen, einschließlich Phorbolester/DAG-bindender Zinkfingermotive, und unterliegt zahlreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung und Acetylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Validieren Sie den Antikörper für den Western Blot (WB) in Ihrem spezifischen Probensystem; erwägen Sie eine Induktion mit Phorbolestern (z. B. PMA), um die PKC-Phosphorylierung zu stimulieren.
• Bei der Immunhistochemie (IHC) an Paraffinschnitten (IHC-P) müssen die Bedingungen für die Antigen-Demaskierung möglicherweise optimiert werden; phospho-spezifische Antikörper erfordern oft eine schonende Demaskierung, um die Phosphorylierung zu erhalten.
• Verwenden Sie den Antikörper für ELISA zum Nachweis von Phospho-PKC (pan) in Zelllysaten oder gereinigten Proteinen; fügen Sie während der Probenvorbereitung Phosphatase-Inhibitoren hinzu, um die Phosphorylierung aufrechtzuerhalten.
• Bestätigen Sie die Spezifität durch Behandlung der Proben mit Lambda-Phosphatase oder durch Verwendung eines nicht-phosphorylierten Peptid-Wettbewerbs.

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