Anti-Phospho-PKC alpha (S319) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P17252

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PKC alpha Funktion und Lokalisierung

• PKC alpha ist eine Calcium-, DAG- und Phospholipid-abhängige Serin/Threonin-Kinase (Gen PRKCA), die als Schlüsselregulator für Zellproliferation, Differenzierung und Apoptose fungiert.
• Es moduliert den MAPK/ERK-Signalweg durch Phosphorylierung von RAF1 und übt anti-apoptotische Effekte durch BCL2-Phosphorylierung und Unterdrückung von p53/TP53-induziertem IGFBP3 aus.
• PKC alpha spielt eine duale Rolle bei Krebs: es fördert die Tumorentstehung in Gliomen und Brustkrebs, induziert jedoch einen Zellzyklusarrest in Darmzellen.
• Im kardiovaskulären System phosphoryliert es kardiales Troponin T (TNNT2), reduziert die Myofilament-Calciumempfindlichkeit und die myokardiale Kontraktilität und fördert Angiogenese und Thrombozytenaggregation.
• Während der Chemokin-gesteuerten T-Zell-Migration phosphoryliert PKC alpha DOCK8, was zu dessen Dissoziation von LRCH1 und Aktivierung von CDC42 führt (PubMed:28028151). Verwandte Referenzen: PMID:28028151
• Es phosphoryliert KLHL3 als Reaktion auf Angiotensin II und moduliert so WNK4-Interaktionen und Ionentransport (PubMed:25313067). Verwandte Referenzen: PMID:25313067
• PKC alpha aktiviert LRRK1, welches RAB-Proteine phosphoryliert und dadurch den intrazellulären Vesikeltransport reguliert (PubMed:36040231). Verwandte Referenzen: PMID:36040231
• Das Protein pendelt zwischen Zytoplasma, Plasmamembran, Mitochondrien und Zellkern; seine primär zytosolische Lokalisierung ändert sich nach Aktivierung, wobei Phosphorylierung ein Schlüsselregulationsmechanismus ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das Ser319 entspricht. Daher wird erwartet, dass dieser Antikörper spezifisch die phosphorylierte Form von PKC alpha erkennt; validieren Sie die Spezifität in Ihrem Proben-System durch Vergleich der Signale zwischen stimulierten und unstimulierten Lysaten oder durch Verwendung einer Phosphatase-Behandlung.
• Für Western Blotting sollten Sie Gesamtzelllysate von humanen, murinen oder Rattigen Zelllinien, die PKC alpha exprimieren, laden und geeignete Blockierungs- und Waschbedingungen verwenden, um unspezifische Bindung zu minimieren.
• Stellen Sie bei ELISA sicher, dass der Antigen-Coating-Puffer und die Konzentration optimiert sind; der Antikörper kann für die Phospho-Peptid-Detektion in kompetitiven oder direkten Formaten verwendet werden.
• Führen Sie immer geeignete positive und negative Kontrollen (z.B. stimulierte vs. unbehandelte Zellen) für die Phospho-spezifische Detektion mit.

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