Anti-Phospho-PKA C-alpha (PRKACA)-S339 Polyklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - P17612

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von PKA C-alpha (PRKACA)

• PKA C-alpha (PRKACA) ist die katalytische Untereinheit der cAMP-abhängigen Proteinkinase, mit einer ubiquitären Isoform 1 und einer spermienspezifischen Isoform 2, wobei letztere in Pachytän-Spermatozyten angereichert ist.
• Sie phosphoryliert eine Vielzahl von Substraten im Zytoplasma und Zellkern, einschließlich Histon H1.4, NFKB1, CDC25B, ABL1, VASP und GLI-Transkriptionsfaktoren, wodurch Prozesse wie Transkriptionsregulation, Zellzyklusprogression und Thrombozytenaggregation gesteuert werden. Zugehörige Referenzen: PMID:15642694 PMID:15905176 PMID:16387847 PMID:15178447
• PRKACA fungiert als entscheidender Inhibitor des Hedgehog-Signalwegs durch Phosphorylierung von GLI1/2/3 und OFD1, was die Prozessierung fördert und die Transkriptionsaktivierung von Zielgenen verhindert. Zugehörige Referenzen: PMID:16705181 PMID:33934390 PMID:36202993 PMID:39138140
• Sie reguliert die mTORC1-Signalübertragung negativ durch Phosphorylierung von RPTOR und moduliert zudem die Kalzium-Signalübertragung durch Phosphorylierung von RYR2. Zugehörige Referenzen: PMID:31112131 PMID:17693412
• In der Reproduktionsphysiologie phosphoryliert Isoform 2 ABL1 im Spermiengeißel-Flagellum, um die Kapazitation zu fördern, während PRKACA in Oozyten die Wiederaufnahme der Meiose durch Inaktivierung von CDC25B verhindert.
• Subzellulär lokalisiert es sich im Zytoplasma, Zellkern, in der Zellmembran, Mitochondrien, Zilien, Flagellen und sekretorischen Vesikeln, was seine pleiotropen Rollen bei der Kompartimentierung der Signalübertragung widerspiegelt.
• Pathogene Mutationen in PRKACA sind mit dem Cushing-Syndrom assoziiert, und die Kinase ist durch die Regulierung von Tight Junctions und anti-invasiven Effekten an der Krebsentstehung beteiligt.
• Das Protein enthält cAMP- und ATP-Bindungsdomänen, eine Myristoylierungsstelle zur Membranverankerung sowie mehrere Phosphorylierungsstellen, die seine Aktivität und Interaktionen regulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper zielt auf das phosphorylierte S339 von PRKACA ab. Um die Spezifität für die phosphorylierte Form zu bestätigen, ziehen Sie die Verwendung von Phosphatase-behandelten Zelllysaten oder eine kompetitive Blockierung mit dem nicht-phosphorylierten Peptid-Antigen in Betracht.
• Für Western Blotting wird in menschlichen Proben eine Bande bei etwa 41 kDa erwartet. Eine Optimierung der Blockierungsbedingungen und der Antikörperverdünnung wird empfohlen, um den Hintergrund zu reduzieren.
• Validieren Sie bei Immunpräzipitation (IP) und ELISA die Leistung des Antikörpers in Ihrer spezifischen Probenmatrix und berücksichtigen Sie bei der Verwendung nicht-menschlicher Spezies eine mögliche Kreuzreaktivität mit anderen PKA-Isoformen.

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