Anti-Phospho-PI3K p85α/p55γ/p85β (Y467/Y199/Y464) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P27986 / O00459 / Q92569

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PI3K-Regulationsuntereinheit p85α (PIK3R1) Funktion und Lokalisierung

• Kodiert durch das PIK3R1-Gen, ist die Phosphatidylinositol-3-Kinase-Regulationsuntereinheit Alpha (p85α) ein Schlüsseladapterprotein, das SH2- und SH3-Domänen enthält und die Rekrutierung der p110-katalytischen Untereinheit an aktivierte Rezeptortyrosinkinasen an der Plasmamembran vermittelt.
• Über seine SH2-Domänen bindet p85α an phosphorylierte Tyrosinreste auf aktivierten Wachstumsfaktorrezeptoren (z.B. FGFR, PDGFR, KIT) und Insulinrezeptorsubstraten und koppelt so p110 an den nachgeschalteten PI3K/AKT-Signalweg. Verwandte Referenzen: PMID:7518429 PMID:17626883 PMID:19805105
• p85α ist für die Insulin-stimulierte Glukoseaufnahme und Glykogensynthese in insulinempfindlichen Geweben essentiell und verbindet so die PI3K-Aktivität mit der metabolischen Homöostase.
• Das Protein moduliert die zelluläre Reaktion auf endoplasmatischen Retikulum-Stress, indem es die nukleäre Translokation von XBP1 fördert und so zur Verbesserung der Glukosetoleranz unter metabolischer Überlastung beiträgt. Verwandte Referenzen: PMID:20348923
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen von p85α (z.B. p55α, p50α), wobei Isoform 2 vorwiegend in Skelettmuskel und Gehirn und in geringeren Mengen in Niere und Herzmuskel exprimiert wird.
• Subzellulär lokalisiert p85α im Zytoplasma, wo es als Monomer oder Dimer vorliegt, und translokalisiert nach Wachstumsfaktorstimulation schnell zu membrangebundenen Signalkomplexen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung an mehreren Tyrosinresten (z.B. Y467), Acetylierung und Ubiquitinierung, die die Proteinstabilität, Interaktionspartner und Signalbeendigung regulieren.
• Das Protein ist auch an Wirt-Virus-Interaktionen beteiligt und wird unter Schlüsselwörtern wie SH2-Domäne, SH3-Domäne, Phosphoprotein und Stressantwort kategorisiert, was seine vielseitigen Rollen in der zellulären Regulation widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid, das den Bereichen um Y467 von humanem p85α entspricht; der Antikörper kreuzreagiert mit äquivalenten Phosphorylierungsstellen in p55γ (Y199) und p85β (Y464). Ziehen Sie in Betracht, die Spezifität durch Peptid-Konkurrenz-Assays oder Phosphatase-Behandlung zu überprüfen.
• Für Western Blotting verwenden Sie Ganzzelllysate, die mit Phosphatase-Inhibitoren hergestellt wurden, um Phospho-Epitope zu erhalten. Erwartete Banden: p85α/p85β bei etwa 81‑84 kDa und p55γ bei etwa 42‑54 kDa. Schließen Sie geeignete Ladekontrollen und Molekulargewichtsmarker ein.
• Der Antikörper wurde für ELISA validiert; für quantitative Analysen ziehen Sie die Paarung mit einem Gesamt-PI3K-Antikörper in Betracht, um Phosphorylierungsniveaus zu normalisieren.
• Um die Reaktivität mit endogenen Proteinen zu bestätigen, testen Sie in gut charakterisierten menschlichen, murinen oder Rattigen Zelllinien (z.B. Insulin-stimulierte oder Wachstumsfaktor-behandelte Proben) und konsultieren Sie die Literatur für die erwartete Phosphorylierungsdynamik.

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