Anti-Phospho-PERK (T982) Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q9NZJ5

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: PERK-Funktion und Lokalisierung

• EIF2AK3/PERK ist ein metabolischer Stress-sensierender Kinase, der eIF2-alpha (EIF2S1) an Ser51 als Reaktion auf endoplasmatischen Retikulum (ER)-Stress phosphoryliert, ein zentraler Schritt der unfolded protein response (UPR).
  Verwandte Referenzen: PMID:10026192, PMID:10677345, PMID:11907036
• Die Phosphorylierung von eIF2-alpha durch PERK hemmt die globale cap-abhängige Translation, während sie selektiv die Translation von stressresponsiven mRNAs wie ATF4 und QRICH1 verbessert, was eine zelluläre Reprogrammierung unter Stress ermöglicht.
  Verwandte Referenzen: PMID:10026192, PMID:10677345, PMID:31023583
• Die PERK-vermittelte UPR verbessert die mitochondriale oxidative Phosphorylierung durch Förderung der ATF4-abhängigen Expression von COX7A2L/SCAF1, was die Bildung von Atmungsketten-Superkomplexen erhöht.
  Verwandte Referenzen: PMID:31023583
• PERK wird an Mitochondrien-ER-Kontaktstellen durch ATAD3A gehemmt, wodurch die Mitochondrien vor dem globalen translationsstillstand der UPR geschützt werden.
  Verwandte Referenzen: PMID:39116259
• Neben eIF2-alpha phosphoryliert PERK auch NFE2L2/NRF2, löst dessen Freisetzung von KEAP1 und die anschließende nukleäre Akkumulation aus, um die Expression von Antioxidans-Genen zu aktivieren.
• PERK ist ein im ER ansässiges Transmembranprotein und ist ubiquitär exprimiert, mit den höchsten Spiegeln in sekretorischen Geweben.
• Das Protein hat ein Molekulargewicht von ~125 kDa und gehört zur Familie der Ser/Thr-Proteinkinasen mit zusätzlicher Tyrosinkinaseaktivität.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches Phosphopeptid erhoben, das dem Phosphorylierungsort Thr982 von menschlichem PERK entspricht; er erkennt spezifisch phosphoryliertes PERK und detektiert nicht die unphosphorylierte Form. Überprüfen Sie die Phosphospezifität in Ihrem experimentellen System, z. B. durch Phosphatasebehandlung.
• Für Western Blot (WB) wird eine Bande von ca. 125 kDa erwartet. Optimieren Sie Blockierung und Antikörperverdünnung, um unspezifische Bindungen zu minimieren, und erwägen Sie das Laden geeigneter Kontrollen (z. B. stressinduzierte vs. ungestresste Zelllysate).
• Für Immunhistochemie (IHC-P) können die Antigen-Retrieval-Bedingungen die Färbung beeinflussen; validieren Sie mit bekannten positiven und negativen Gewebeproben und erwägen Sie die Verwendung eines phosphospezifischen Nachweisprotokolls.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus- und Ratten-PERK, was translationswissenschaftliche Studien ermöglicht; bestätigen Sie jedoch die Reaktivität in Ihrem spezifischen Gewebe oder Ihren Zelllinien, da der Phosphorylierungsstatus variieren kann.
• Für ELISA-Anwendungen kann dieser Antikörper als Nachweis- oder Capture-Reagenz verwendet werden, jedoch müssen die Assay-Bedingungen (Beschichtung, Blockierung, Nachweismethode) für den phosphospezifischen Nachweis optimiert werden.

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