Anti-Phospho-PDGFRB (Y1021) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA – P09619

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PDGFRB

• Der Plättchen-abgeleitete Wachstumsfaktorrezeptor Beta (PDGFRB, auch bezeichnet als CD140b) ist ein Tyrosinkinase-Rezeptor auf der Zelloberfläche, der Homodimere von PDGFB und PDGFD sowie PDGFA/PDGFB-Heterodimere bindet und so intrazelluläre Signalübertragung initiiert.
• Er spielt eine entscheidende Rolle bei der Embryonalentwicklung, insbesondere im kardiovaskulären System, indem er die Proliferation, Migration und Rekrutierung von Perizyten und vaskulären glatten Muskelzellen zu neu entstehenden Blutgefäßen fördert.
• Ligandeninduzierte Dimerisierung löst die Autophosphorylierung spezifischer Tyrosinreste (einschließlich Y1021) aus, die als Andockstellen für Signalkörper mit SH2-Domäne dienen und Pfade wie die PLCG1–Ca²⁺/PKC-, PI3K–AKT- und RAS–MAPK-Kaskaden aktivieren.
• PDGFRB ist essenziell für die normale Entwicklung der Nierenglomeruli, wo es die Rekrutierung von Mesangialzellen und Kapillarverzweigung vermittelt, und es treibt die Neointimabildung nach Gefäßverletzungen an.
• Der Rezeptor lokalisiert sich hauptsächlich auf der Zellmembran, wird aber nach Aktivierung schnell in zytoplasmatische Vesikel und Lysosomen internalisiert – ein Mechanismus, der die nachgeschaltete Signalübertragung abschwächt.
• Als Proto-Onkogen ist PDGFRB durch Chromosomenumordnungen (z. B. bei chronischer myelomonozytärer Leukämie) und Überexpression bei Glioblastomen und Sarkomen an der Onkogenese beteiligt, was seine Rolle bei Zellproliferation, Chemotaxis und Überleben unterstreicht.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, und das Protein ist umfangreich durch N-verknüpfte Glykosylierung und Disulfidbindungen innerhalb seiner immunoglobulinähnlichen Domänen modifiziert.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches Phosphopeptid gerichtet, das den Resten um phosphoryliertes Y1021 entspricht; um die phosphorylierungsspezifische Bindung zu bestätigen, sollten Sie vor dem Western Blot eine Phosphatasebehandlung von Zelllysaten durchführen oder ortsgerichtete Mutagenese des Zieltyrosins verwenden.
• Für Western Blot beträgt das vorausgesagte Molekulargewicht von PDGFRB ~124 kDa; allerdings wandert das reife Glykoprotein aufgrund der Glykosylierung oft bei einer höheren scheinbaren Masse (150–180 kDa). Verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker und validieren Sie die Bandenidentität mit positiven (z. B. PDGF-stimulierten) und negativen (serumverhungerten) Kontrollen.
• Der Antikörper ist für ELISA geeignet; bei der Gestaltung von Capture/Detection-Formaten kombinieren Sie ihn mit einem Gesamt-PDGFRB-Antikörper oder einem anderen phosphospezifischen Klon, um die Assayspezifität zu erhöhen.
• Kreuzreaktivität mit PDGFRB von Mensch, Maus und Ratte ist zu erwarten; überprüfen Sie die Leistung in der gewünschten Art und Gewebe unter Verwendung der empfohlenen Anfangsverdünnungen für jede Anwendung.

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