Anti-Phospho-PDGFR alpha-Y754 Kaninchen-Polyklonalantikörper für WB, ELISA - P16234

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PDGFR alpha-Funktion und Lokalisierung

• Der platelet-derived growth factor receptor alpha (PDGFRA, auch PDGFR2, CD140A genannt) ist ein Mitglied der Rezeptor-Tyrosinkinase-Familie Typ III, gekennzeichnet durch fünf immunoglobulinähnliche extrazelluläre Domänen und eine gespaltene intrazelluläre Tyrosinkinase-Domäne.
• Er fungiert als Zelloberflächenrezeptor für platelet-derived growth factors (PDGFA, PDGFB, PDGFC) und spielt eine zentrale Rolle in der Embryonalentwicklung durch die Regulation von Zellproliferation, -überleben, -migration und Chemotaxis.
• Die PDGFRA-Signalübertragung ist essentiell für die normale Skelettbildung, den Verschluss des Kopfes und die Entwicklung der gastrointestinalen Mukosa und Darmzotten sowie für die Rekrutierung mesenchymaler Zellen während der Organogenese.
• Ligandenbindung löst Rezeptordimerisierung und Autophosphorylierung an mehreren Tyrosinresten (einschließlich Y754) aus, was zur Aktivierung nachgeschalteter Signalwege wie PI3K-AKT, MAPK/ERK und STAT-Signalkaskaden führt.
• Die Aktivierung von PLCG1 durch PDGFRA resultiert in der Produktion von Diacylglycerol und Inositol-1,4,5-trisphosphat, was zur Mobilisierung von zytosolischem Ca2+ und Aktivierung der Proteinkinase C führt.
• Subzellulär ist PDGFRA hauptsächlich an der Zellmembran zu finden, wird aber auch im Golgi-Apparat und in primären Zilien nachgewiesen, was seine dynamische Lokalisierung und seinen Transport widerspiegelt.
• Zusätzlich zu seinen entwicklungsbiologischen Rollen ist PDGFRA an der Thrombozytenaktivierung, Agonistensekretion und thrombininduzierten Thrombozytenaggregation beteiligt, was seine Bedeutung für die Hämostase und Wundheilung unterstreicht.
• PDGFRA wird in vielen Geweben exprimiert, einschließlich Gehirn, Fibroblasten, glatter Muskulatur, Herz und Embryonen, und ist in verschiedenen Krebsarten hochreguliert, was ihn zu einem interessanten Ziel in der onkologischen Forschung macht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Y754; überprüfen Sie die Phosphorylierungsspezifität durch Vergleich der Signale vor und nach Phosphatasebehandlung oder durch Verwendung eines nicht-phosphorylierten Peptids als Blockierungskontrolle.
• Für den Western Blot ist das erwartete Molekulargewicht ~123 kDa, aber Glykosylierung und andere Modifikationen können leichte Verschiebungen verursachen. Validieren Sie den Antikörper unter reduzierenden und nicht-reduzierenden Bedingungen in den relevanten Zelllysaten.
• Optimieren Sie im ELISA die Beschichtungsbedingungen und Nachweisschritte, um phosphoryliertes PDGFRA in Zell- oder Gewebeextrakten zu quantifizieren. Schließen Sie positive und negative Kontrollen ein, um die Assay-Spezifität sicherzustellen.
• Die Kreuzreaktivität ist als human angegeben; wenn Sie mit anderen Spezies arbeiten, überprüfen Sie die Sequenzhomologie um Y754, um eine potenzielle Kreuzreaktivität vorherzusagen, und führen Sie eine experimentelle Validierung durch.

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