Anti-Phospho-p90Rsk/RSK1/RPS6KA1 (S380) Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q15418

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RPS6KA1 (RSK1) Funktion und Lokalisierung

• RPS6KA1 (RSK1) ist eine Serin/Threonin-Kinase der p90 ribosomalen S6-Kinase-Familie, auch bekannt als p90RSK1, MAPKAPK1 und RSK1, kodiert durch das RPS6KA1-Gen; alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.
• Wirkt stromabwärts der ERK1/2 (MAPK3/MAPK1)-Signalgebung, um die mitogene und stressinduzierte Aktivierung der Transkriptionsfaktoren CREB1, ETV1/ER81 und NR4A1/NUR77 zu vermitteln und koppelt so die MAPK-Kaskade an die transkriptionelle Regulation. Verwandte Referenzen: PMID:10679322 | PMID:12213813 | PMID:15117958
• Reguliert die cap-abhängige Translation durch Phosphorylierung des ribosomalen Proteins S6 (RPS6) über einen mTOR-unabhängigen Mechanismus und des eukaryotischen Translationsinitiationsfaktors 4B (EIF4B), wodurch seine Affinität zum EIF3-Komplex erhöht wird. Verwandte Referenzen: PMID:17360704 | PMID:16763566
• Moduliert die mTOR-Signalgebung durch direkte Phosphorylierung von TSC2 an Ser1798 (Hemmung seiner GAP-Aktivität) sowie Phosphorylierung von RPTOR und DEPTOR und beeinflusst somit die Aktivitäten von mTORC1 und mTORC2. Verwandte Referenzen: PMID:15342917 | PMID:22017876
• Fördert das Zellüberleben durch Phosphorylierung und Inaktivierung der pro-apoptotischen Faktoren BAD und DAPK1 und unterstützt das Überleben von hepatischen Sternzellen durch CEBPB-Phosphorylierung. Verwandte Referenzen: PMID:10679322 | PMID:16213824 | PMID:11684016
• Reguliert den Zellzyklusfortschritt durch Phosphorylierung von CDKN1B (p27Kip1), fördert dessen 14-3-3-Bindung und zytoplasmische Retention und steuert die Zellmigration durch EPHA2-Phosphorylierung an Ser897. Verwandte Referenzen: PMID:18508509 | PMID:18813292 | PMID:26158630
• Lokalisiert sowohl im Kern als auch im Zytoplasma, was duale Funktionen in der transkriptionellen Regulation und der zytoplasmatischen Signalgebung ermöglicht.
• Enthält zwei nicht identische Kinasedomänen, benötigt ATP und Magnesium für die Aktivität und wird durch mehrere Phosphorylierungsereignisse reguliert, einschließlich Ser380 in der Linker-Region, die für die Aktivierung kritisch ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phospho-Peptid um Ser380 von humanem RSK1; erwägen Sie die Verwendung einer Lambda-Phosphatase-Behandlung oder Ser380-nicht-phosphorylierbarer Mutanten im WB, um die Phospho-Spezifität zu bestätigen.
• Für WB beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~83 kDa; verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker und validieren Sie mit bekannten positiven Kontrollen (z. B. EGF-stimulierte Zellen) aufgrund der phosphorylierungsabhängigen Mobilitätsverschiebungen von RSK1.
• Optimieren Sie im ELISA die Beschichtungsbedingungen (pH, Peptidkonzentration), um die Integrität des Phospho-Epitops zu erhalten, und fügen Sie Nicht-Phospho-Peptid-Kontrollen hinzu, um die Spezifität sicherzustellen.
• Kreuzreagiert mit Maus- und Ratten-RSK1; überprüfen Sie die Sequenzhomologie um die Phosphostelle für diese Spezies, um die Detektion vorherzusagen.

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