Anti-Phospho-p70 S6 Kinase 1 (Ser371) Kaninchen pAb für WB und ELISA - P23443

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: p70 S6 Kinase 1 (RPS6KB1) Funktion und Lokalisierung

• Ribosomales Protein S6 Kinase beta-1, kodiert durch RPS6KB1, ist auch bekannt als p70 S6 Kinase alpha (p70S6K1), S6K1, STK14A und p70 S6KA. Mehrere Isoformen entstehen durch alternatives Spleißen und alternative Initiierung.
• Fungiert als Ser/Thr-Kinase stromabwärts von mTORC1, phosphoryliert wichtige Translationsregulatoren einschließlich RPS6, EIF4B und EEF2K, um die Cap-abhängige Proteinsynthese anzutreiben (PubMed:11500364, PubMed:12801526, PubMed:14673156). Verwandte Referenzen: PMID:11500364 PMID:12801526 PMID:14673156
• Fördert Zellwachstum, Proliferation und Zellzyklusfortschritt durch Integration von Signalen von Wachstumsfaktoren und Nährstoffverfügbarkeit (PubMed:12801526, PubMed:14673156). Verwandte Referenzen: PMID:12801526 PMID:14673156
• In Abwesenheit von Mitogenen assoziiert inaktives p70S6K1 mit dem EIF3-Komplex; mTORC1-vermittelte Phosphorylierung löst Dissoziation und Aktivierung aus (PubMed:16286006). Verwandte Referenzen: PMID:16286006
• Trägt zum Zellüberleben bei, indem es den pro-apoptotischen Faktor BAD phosphoryliert und inhibiert (By similarity), und vermittelt TNF-induzierte Insulinresistenz über Phosphorylierung und Abbau von IRS1 (PubMed:18952604). Verwandte Referenzen: PMID:18952604
• Lokalisiert im Zytoplasma, Zellkern, äußeren Mitochondrienmembran und synaptischen Kompartimenten, was die Regulation von Translation, Apoptose und zytoskelettaler Dynamik ermöglicht.
• Unterliegt umfassender posttranslationaler Kontrolle: Wichtige Phosphorylierungsstellen umfassen Thr389 (mTORC1), Thr229 (PDK1) und Ser371 innerhalb der Linker-Region, zusammen mit Acetylierungsereignissen. (Schlüsselwörter: Phosphoprotein, Acetylierung, ATP-Bindung, Nukleotid-Bindung).
• Weit verbreitet in humanen Geweben exprimiert, was seine grundlegende Rolle in der zellulären Homöostase unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da dieser Antikörper gegen ein Phospho-Ser371-Peptid hergestellt wurde, empfehlen wir, Phosphatase-Inhibitoren in Lysepuffern zu verwenden, um die Phosphorylierung während der Probenvorbereitung zu erhalten.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität durch Behandlung von Zelllysaten mit Lambda-Phosphatase oder durch Durchführung von Peptidkompetitionsassays unter Verwendung sowohl phosphorylierter als auch nicht-phosphorylierter Ser371-Peptide.
• In WB ist ein Hauptband bei etwa 59 kDa für endogenes p70S6K1 zu erwarten; zusätzliche Bänder können Isoformen oder andere kreuzreaktive Spezies darstellen; bestätigen Sie die Identität mit geeigneten Kontrollen.
• Es wurde berichtet, dass dieser Antikörper mit Maus-p70S6K1 kreuzreagiert; für Mausstudien, überprüfen Sie die Leistung unter Verwendung von Mausgewebe oder Zelllysaten.
• Für ELISA-Anwendungen, erwägen Sie die Beschichtung mit dem Immunogen-Peptid oder einem rekombinanten Phospho-Ser371-Proteinfragment und titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitskonzentration zu bestimmen.

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