Anti-Phospho-p70 S6 Kinase 1-S371 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P23443

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von p70 S6 Kinase 1

• RPS6KB1 (p70 S6 Kinase 1) ist eine Serin/Threonin-Kinase, die downstream von mTORC1-Signalwegen als Reaktion auf Wachstumsfaktoren und Nährstoffe wirkt und die Zellproliferation, das Wachstum und den Zellzyklusfortschritt fördert. Verwandte Referenzen: PMID:11500364 PMID:12801526 PMID:14673156
• Sie reguliert die cap-abhängige Translation durch Phosphorylierung von EIF4B, RPS6 und durch Hemmung von EEF2K, wodurch EEF2 aktiviert wird, sowie durch Förderung der Pioneer-Runden-Translation über POLDIP3/SKAR. Verwandte Referenzen: PMID:11500364 PMID:12801526 PMID:14673156 PMID:15341740
• Bei Nährstoffmangel bindet inaktives RPS6KB1 an den EIF3-Komplex; bei mitogener Stimulation verursacht die mTORC1-Phosphorylierung Dissoziation und Aktivierung. Verwandte Referenzen: PMID:16286006
• Die Kinase vermittelt das Zellüberleben durch Phosphorylierung des pro-apoptotischen Faktors BAD (nach Ähnlichkeit) und durch Phosphorylierung des mitochondrialen URI1, um PP1CC freizusetzen, welches RPS6KB1 an Thr-412 in einer negativen Rückkopplungsschleife dephosphoryliert. Verwandte Referenzen: PMID:17936702
• RPS6KB1 beteiligt sich an der Rückkopplungshemmung von mTORC2/AKT-Signalwegen durch Phosphorylierung von SIN1, MTOR, RICTOR und DEPTOR. Verwandte Referenzen: PMID:15899889 PMID:19720745 PMID:19935711 PMID:22017876
• Sie trägt zur TNF-induzierten Insulinresistenz bei, indem sie IRS1 an Serinresten phosphoryliert, was zum Abbau von IRS1 führt. Verwandte Referenzen: PMID:18952604
• Die Kinase phosphoryliert und aktiviert CAD, ein Schlüsselenzym der Pyrimidin-Biosynthese, und EPRS, um die Aufnahme von Fettsäuren in Adipozyten zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:23429703 PMID:28178239
• Subzellulär lokalisiert sich RPS6KB1 im Zytoplasma, Kern, der äußeren Mitochondrienmembran und der Synapse, was seine vielfältigen Signalrollen widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das Ser371 von menschlichem RPS6KB1 entspricht; wir empfehlen, die Spezifität des Antikörpers für die phosphorylierte Form mittels Phosphatase-behandelten Lysaten oder konkurrierendem nicht-phosphoryliertem Peptid zu validieren.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ca. 59 kDa (obwohl es aufgrund der Phosphorylierung bei etwa 70 kDa wandern kann). Fügen Sie während der Probenvorbereitung Protease- und Phosphataseinhibitoren hinzu.
• Für ELISA sollten Sie das phosphorylierte Peptid als Positivkontrolle und das nicht-phosphorylierte Peptid verwenden, um die Phospho-Spezifität zu bewerten.
• Validieren Sie die Kreuzreaktivität in Mausproben unabhängig; die menschlichen und murinen Sequenzen sind um Ser371 herum hoch konserviert.
• Eine Optimierung der Antikörperverdünnung und Blockierungsbedingungen kann für verschiedene experimentelle Setups erforderlich sein.

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