Anti-Phospho-p53 (T55) Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB und ELISA - P04637

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: p53-Funktion und -Lokalisierung

• p53, auch bekannt als zelluläres Tumorantigen p53, Phosphoprotein p53 und Tumorsuppressor p53, ist ein multifunktioneller Transkriptionsfaktor, der vom TP53-Gen kodiert wird. Es spielt eine kritische Rolle bei der Tumorsuppression, indem es Zellzyklusarrest, DNA-Reparatur oder Apoptose als Reaktion auf zellulären Stress induziert. Verwandte Referenzen: PMID:11025664 PMID:12524540 PMID:12810724
• Einer seiner Schlüsselmechanismen ist die negative Regulation der Zellteilung durch Kontrolle der Expression von Genen, die für diesen Prozess erforderlich sind, einschließlich der Aktivierung eines zyklinabhängigen Kinase-Inhibitors. Dies führt zu einem Zellzyklusarrest am G1/S-Checkpunkt. Verwandte Referenzen: PMID:11025664 PMID:12524540 PMID:12810724
• p53 induziert Apoptose durch Stimulation der BAX- und FAS-Antigen-Expression oder durch Repression der Bcl-2-Expression. Seine pro-apoptotische Aktivität wird durch Interaktion mit PPP1R13B/ASPP1 oder TP53BP2/ASPP2 verstärkt und durch PPP1R13L/iASPP gehemmt. Verwandte Referenzen: PMID:12524540 PMID:17189187
• Das Protein lokalisiert sich in mehreren subzellulären Kompartimenten, einschließlich des Zellkerns, Zytoplasmas, der Mitochondrien, des endoplasmatischen Retikulums und der Zentrosomen. Diese dynamische Verteilung ist mit seinen vielfältigen regulatorischen Funktionen in der Transkription, Apoptose und im Stoffwechsel verbunden.
• p53 unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung, Methylierung und Ubiquitinierung, die seine Stabilität, DNA-Bindungsaffinität und transkriptionelle Aktivität modulieren. Die Phosphorylierungsstelle Threonin 55 (T55) ist relevant für die Untersuchung der p53-Aktivierungssignalgebung.
• Isoformen von p53 (Isoformen 2, 3, 4, 7, 8, 9) zeigen gewebesabhängige Expression und unterschiedliche regulatorische Funktionen, wie die Verstärkung oder Unterdrückung der Transaktivierungsaktivität von Isoform 1, was zur Komplexität der p53-Signalnetzwerke beiträgt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde unter Verwendung eines synthetischen Phosphopeptids erzeugt, das T55 von humanem p53 entspricht. Er ist darauf ausgelegt, die Phosphorylierung an dieser Stelle zu erkennen; erwägen Sie die Verwendung von phosphatasetbehandelten Proben als Negativkontrolle, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für Western Blotting (WB) validieren Sie gegen Lysate von Zellen, von denen bekannt ist, dass sie Phospho-p53 unter DNA-Schädigungsbedingungen exprimieren (z. B. Behandlung mit Etoposid oder UV-Bestrahlung). Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt ~44 kDa, aber phosphorylierte Formen können leichte Verschiebungen aufweisen.
• In ELISA-Anwendungen immobilisieren Sie den Antikörper oder das Peptidantigen angemessen und schließen Kontrollen mit nicht-phosphoryliertem Peptid ein, um die phosphospezifische Bindung zu bewerten.

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