Anti-Phospho-p53 (S33) Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IHC-P, IP, ELISA - P04637

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von p53

• Das vom TP53-Gen kodierte zelluläre Tumorantigen p53 ist ein multifunktionaler Transkriptionsfaktor, der als potenter Tumorsuppressor wirkt, indem er Zellzyklusarrest, DNA-Reparatur und Apoptose als Reaktion auf verschiedene zelluläre Stressoren reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:11025664 PMID:12524540 PMID:12810724

• p53 übt seine pro-apoptotischen Funktionen sowohl durch transkriptionelle Aktivierung (z. B. BAX und FAS) als auch durch Repression (z. B. Bcl-2) aus, wobei seine Aktivität durch Interaktionen mit Proteinen der ASPP-Familie moduliert wird. Verwandte Referenzen: PMID:12524540 PMID:17189187

• Jenseits der nukleären Transkription lokalisiert p53 auch im Zytoplasma, an Mitochondrien, das endoplasmatische Retikulum und die Zentrosomen, was seine Beteiligung an nicht-transkriptioneller Apoptose und Nekrose widerspiegelt.

• p53 wird ubiquitär in allen normalen menschlichen Geweben exprimiert, wobei mehrere alternative Isoformen gewebsabhängige Expressionsmuster aufweisen.

• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Acetylierung, Methylierung und Ubiquitinierung, die die Stabilität, subzelluläre Lokalisation und transkriptionelle Aktivität von p53 streng regulieren.

• p53 trägt zur Regulation des circadianen Rhythmus bei, indem es die CLOCK-BMAL1-vermittelte transkriptionelle Aktivierung von PER2 unterdrückt. Verwandte Referenzen: PMID:24051492

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid, das den Resten um Ser33 von menschlichem p53 entspricht. Zur Validierung der Phospho-Spezifität sollten Sie parallel mit Lambda-Phosphatase behandelte Proben oder eine Nicht-Phosphopeptid-Konkurrenz verwenden.
• Für Western Blot (WB) beträgt die vorhergesagte Bandengröße ~53 kDa (kanonisches p53) oder 44 kDa (einige Isoformen); Banden können aufgrund von Phosphorylierung und anderen Modifikationen leicht verschoben sein.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) können Antigen-Retrieval-Bedingungen und Gewebefixierung die Detektion von Phospho-Epitopen beeinflussen; optimieren Sie die Bedingungen mit bekannten Positivkontrollen wie bestrahlten oder genotoxisch beanspruchten Geweben.
• Bei der Durchführung von Immunpräzipitation (IP) oder ELISA verwenden Sie geeignete IgG-Kontrollen und kombinieren Sie den Antikörper mit einem Gesamt-p53-Antikörper, um die Phosphorylierungsstöchiometrie zu bestimmen.
• Dieser Antikörper kreuzreagiert mit Maus- und Ratten-p53, was ihn für translational Forschung geeignet macht; bestätigen Sie jedoch immer die Kreuzreaktivität in Ihrem spezifischen Modellsystem.

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